Dataset Viewer (First 5GB)
	id
				 
			stringlengths 2 
			9 
			 | sections
				 
			sequence  | sec_text
				 
			sequence  | extractive_keyphrases
				 
			sequence  | abstractive_keyphrases
				 
			sequence  | sec_bio_tags
				 
			sequence  | 
|---|---|---|---|---|---|
	18980258 
 | 
	[
  "visual sleep staging is still the most widely used procedure to analyze sleep. it allows one",
  "sleep stages",
  "subjects and procedures",
  "eeg parameter = (frequency time portion) sum of all time portions",
  "statistical analysis",
  "results",
  "discussion",
  "heterogeneity of sleep stages",
  "spatial representation of sleep trajectory",
  "sleep as a continuum versus sleep staging",
  "title",
  "abstract"
]  | 
	[
  [
    "TO",
    "SUBDIVIDE",
    "SLEEP",
    "RECORDINGS",
    "INTO",
    "discrete",
    "states",
    "or",
    "stages,",
    "defined",
    "by",
    "coherent",
    "and",
    "recurrent",
    "patterns",
    "of",
    "one",
    "1",
    "or",
    "more",
    "2",
    "electrophysiologic",
    "signals.",
    "Based",
    "on",
    "this",
    "method,",
    "human",
    "sleep",
    "has",
    "been",
    "defined",
    "as",
    "an",
    "alternating",
    "sequence",
    "of",
    "4",
    "stages",
    "of",
    "non-rapid",
    "eye",
    "movement",
    "sleep",
    "(NREM",
    "stages",
    "1",
    "to",
    "4),",
    "and",
    "rapid",
    "eye",
    "movement",
    "(REM)",
    "sleep.",
    "3",
    "Although",
    "there",
    "is",
    "unanimous",
    "acceptance",
    "of",
    "the",
    "existence",
    "of",
    "2",
    "different",
    "states",
    "of",
    "sleep,",
    "REM",
    "and",
    "NREM",
    "sleep,",
    "different",
    "conceptions",
    "of",
    "the",
    "structure",
    "of",
    "NREM",
    "sleep",
    "have",
    "been",
    "proposed.",
    "Based",
    "on",
    "quantitative",
    "electroencephalographic",
    "analysis",
    "during",
    "sleep,",
    "NREM",
    "sleep",
    "can",
    "be",
    "represented",
    "as",
    "a",
    "continuum",
    "instead",
    "of",
    "a",
    "staged",
    "process.",
    "4,",
    "5",
    "A",
    "continuous",
    "representation",
    "of",
    "NREM",
    "sleep",
    "allows",
    "one",
    "to",
    "model",
    "the",
    "sleep",
    "process",
    "by",
    "quantitative",
    "variables,",
    "such",
    "as",
    "the",
    "mean",
    "electroencephalographic",
    "(EEG)",
    "frequency",
    "or",
    "the",
    "power",
    "of",
    "different",
    "EEG",
    "frequency",
    "bands.",
    "6,",
    "7,",
    "8",
    "In",
    "contrast",
    "with",
    "this,",
    "the",
    "strongest",
    "point",
    "for",
    "sleep",
    "staging",
    "is",
    "that",
    "it",
    "allows",
    "the",
    "integration",
    "of",
    "a",
    "variety",
    "of",
    "electrophysiologic",
    "information",
    "from",
    "different",
    "recording",
    "channels",
    "into",
    "a",
    "reasonably",
    "small",
    "number",
    "of",
    "well-defined",
    "stages..",
    "Sleep",
    "staging",
    "is",
    "confronted",
    "with",
    "2",
    "major",
    "difficulties:",
    "first,",
    "how",
    "to",
    "exactly",
    "delineate",
    "neighboring",
    "stages,",
    "and",
    "second,",
    "how",
    "to",
    "handle",
    "intrastate",
    "variability?",
    "Both",
    "points",
    "have",
    "an",
    "influence",
    "on",
    "the",
    "reliability",
    "of",
    "sleep",
    "studies.",
    "9",
    "Although",
    "rules",
    "for",
    "the",
    "definition",
    "of",
    "sleep",
    "states",
    "and",
    "stages",
    "have",
    "been",
    "developed,",
    "2",
    "the",
    "question",
    "of",
    "intrastate",
    "heterogeneity",
    "has",
    "been",
    "widely",
    "ignored.",
    "Exceptions",
    "consist",
    "of",
    "a",
    "few",
    "scattered",
    "proposals",
    "to",
    "subdivide",
    "the",
    "sleep-onset",
    "process",
    "into",
    "fine-graded",
    "steps,",
    "10",
    "to",
    "study",
    "differences",
    "between",
    "stage",
    "2",
    "sleep",
    "early",
    "and",
    "late",
    "in",
    "night-time",
    "sleep,",
    "11",
    "or",
    "to",
    "subdivide",
    "NREM",
    "and",
    "REM",
    "sleep",
    "into",
    "tonic",
    "and",
    "phasic",
    "segments.",
    "12",
    "Another",
    "approach",
    "to",
    "subdivide",
    "the",
    "NREM",
    "sleep",
    "process",
    "into",
    "meaningful",
    "subunits",
    "has",
    "been",
    "proposed",
    "by",
    "Terzano",
    "and",
    "coworkers.",
    "13,",
    "14",
    "These",
    "authors",
    "developed",
    "the",
    "concept",
    "of",
    "a",
    "cyclic",
    "alternating",
    "pattern",
    "(CAP),",
    "corresponding",
    "to",
    "different",
    "functional",
    "states",
    "of",
    "arousal-control",
    "mechanisms",
    "during",
    "NREM",
    "sleep.",
    "15",
    "In",
    "a",
    "recent",
    "study,",
    "Brandenberger",
    "et",
    "al",
    "16",
    "called",
    "into",
    "question",
    "the",
    "homogeneity",
    "of",
    "stage",
    "2",
    "sleep.",
    "These",
    "authors",
    "presented",
    "data",
    "that",
    "suggest",
    "that",
    "2",
    "types",
    "of",
    "stage",
    "2",
    "sleep",
    "can",
    "be",
    "differentiated,",
    "a",
    "quiet",
    "one,",
    "preceding",
    "slow-wave",
    "sleep,",
    "and",
    "an",
    "active",
    "one,",
    "preceding",
    "REM",
    "sleep..",
    "Sleep",
    "staging",
    "is",
    "a",
    "rule-based",
    "procedure,",
    "which",
    "uses",
    "expert",
    "knowledge",
    "to",
    "define",
    "which",
    "combination",
    "of",
    "electrophysiologic",
    "patterns",
    "defines",
    "a",
    "sleep",
    "stage.",
    "2",
    "As",
    "an",
    "alternative,",
    "a",
    "statistical",
    "analysis",
    "could",
    "explore",
    "which",
    "pattern",
    "configurations,",
    "extracted",
    "from",
    "EEG,",
    "electromyogram",
    "(EMG),",
    "electrooculogram,",
    "or",
    "any",
    "other",
    "physiologic",
    "signal,",
    "are",
    "either",
    "typical,",
    "ie,",
    "occur",
    "more",
    "frequently,",
    "or",
    "atypical,",
    "i.e.,",
    "occur",
    "less",
    "frequently,",
    "relative",
    "to",
    "one's",
    "expectation.",
    "The",
    "configural",
    "frequency",
    "analysis",
    "(CFA)",
    "17",
    "is",
    "a",
    "nonparametric",
    "taxonomic",
    "statistical",
    "analysis",
    "that",
    "allows",
    "one",
    "to",
    "identify",
    "overrepresentations",
    "(types)",
    "or",
    "underrepresentations",
    "(antitypes)",
    "in",
    "the",
    "frequency",
    "distribution",
    "of",
    "multiple",
    "variable",
    "classifications.",
    "This",
    "procedure",
    "examines",
    "the",
    "statistical",
    "significance",
    "of",
    "patterns",
    "of",
    "cell",
    "frequencies",
    "in",
    "cross-tabulated",
    "data",
    "and",
    "defines",
    "types",
    "or",
    "antitypes,",
    "depending",
    "on",
    "whether",
    "observed",
    "cell",
    "frequencies",
    "are",
    "greater",
    "or",
    "smaller",
    "than",
    "expected",
    "by",
    "the",
    "marginal",
    "distribution..",
    "The",
    "objective",
    "of",
    "the",
    "present",
    "study",
    "was",
    "to",
    "investigate",
    "the",
    "structure",
    "of",
    "sleep",
    "by",
    "means",
    "of",
    "the",
    "CFA.",
    "We",
    "applied",
    "the",
    "CFA",
    "to",
    "3",
    "continuously",
    "measured",
    "variables",
    "during",
    "sleep:",
    "(a)",
    "an",
    "EEG",
    "parameter",
    "(EEG-P),",
    "representing",
    "the",
    "distribution",
    "of",
    "EEG",
    "wave",
    "lengths,"
  ],
  [
    "Study",
    "Objectives:",
    "To",
    "study",
    "the",
    "structure",
    "of",
    "human",
    "sleep",
    "at",
    "the",
    "level",
    "of",
    "sleep",
    "stages.",
    "We",
    "applied",
    "taxonomic",
    "statistics",
    "to",
    "detect",
    "significant",
    "configurations",
    "(types)",
    "of",
    "different",
    "physiologic",
    "variables",
    "and",
    "their",
    "relationship",
    "to",
    "sleep",
    "stages.",
    "Design",
    "and",
    "Statistics:",
    "Polygraphic",
    "sleep",
    "recordings",
    "from",
    "32",
    "subjects",
    "(normal",
    "sleepers",
    "as",
    "well",
    "as",
    "patients",
    "with",
    "insomnia,",
    "sleep",
    "apnea,",
    "or",
    "narcolepsy;",
    "n",
    "=",
    "8",
    "per",
    "group)",
    "were",
    "visually",
    "scored",
    "and",
    "submitted",
    "to",
    "a",
    "configural",
    "frequency",
    "analysis.",
    "The",
    "configural",
    "frequency",
    "analysis",
    "was",
    "computed",
    "with",
    "3",
    "continuous",
    "input",
    "variables:",
    "an",
    "electroencephalogram",
    "parameter,",
    "which",
    "represents",
    "the",
    "point",
    "of",
    "gravity",
    "of",
    "the",
    "EEG",
    "frequency",
    "distribution;",
    "the",
    "alpha",
    "slow-wave",
    "index,",
    "and",
    "the",
    "Rest",
    "Index,",
    "based",
    "on",
    "the",
    "presence",
    "or",
    "absence",
    "of",
    "phasic",
    "electromyographic",
    "activity.",
    "These",
    "variables",
    "were",
    "dichotomized",
    "for",
    "further",
    "analysis.",
    "The",
    "combination",
    "of",
    "2",
    "levels",
    "(",
    "+",
    "or",
    "-)",
    "and",
    "3",
    "variables",
    "resulted",
    "in",
    "2",
    "3",
    "patterns",
    "(",
    "+++",
    "to",
    "---",
    "similar",
    "to",
    "other",
    "continuous",
    "EEG",
    "parameters",
    "4,",
    "18",
    ";",
    "(b)",
    "the",
    "alpha",
    "slow-wave",
    "index",
    "(ASI)",
    "19",
    ";",
    "and",
    "(c)",
    "the",
    "rest",
    "index",
    "(RI),",
    "based",
    "on",
    "the",
    "amount",
    "of",
    "phasic",
    "or",
    "transient",
    "EMG",
    "activity.",
    "20",
    "We",
    "selected",
    "these",
    "parameters",
    "because",
    "they",
    "are",
    "continuous,",
    "independent",
    "from",
    "staging",
    "rules,",
    "and",
    "belong",
    "to",
    "the",
    "standard",
    "of",
    "our",
    "sleep-analysis",
    "system.",
    "The",
    "EEG",
    "parameter",
    "describes",
    "the",
    "time",
    "course",
    "of",
    "EEG",
    "activity",
    "during",
    "sleep,",
    "which",
    "varies",
    "between",
    "low-amplitude",
    "fast",
    "waves",
    "in",
    "wakefulness",
    "and",
    "high-amplitude",
    "slow",
    "waves",
    "during",
    "deep",
    "NREM",
    "sleep.",
    "The",
    "ASI,",
    "which",
    "is",
    "based",
    "on",
    "the",
    "proportion",
    "of",
    "alpha",
    "to",
    "slowwave",
    "EEG",
    "activity,",
    "recognizes",
    "fairly",
    "long",
    "arousals",
    "and",
    "intervening",
    "wakefulness.",
    "19",
    "Finally,",
    "the",
    "RI",
    "is",
    "a",
    "measure",
    "of",
    "motor",
    "rest",
    "or",
    "unrest,",
    "based",
    "on",
    "the",
    "presence",
    "or",
    "absence",
    "of",
    "transient",
    "EMG",
    "activity.",
    "20,",
    "21",
    "Each",
    "of",
    "the",
    "3",
    "continuous",
    "variables",
    "EEG-P",
    "(E),",
    "ASI",
    "(A),",
    "and",
    "RI",
    "(R)",
    "was",
    "dichotomized,",
    "and",
    "the",
    "resulting",
    "cross-tabulation",
    "was",
    "tested",
    "for",
    "significant",
    "patterns",
    "of",
    "configurations.",
    "Significant",
    "configurations",
    "or",
    "types",
    "were",
    "matched",
    "with",
    "conventional",
    "sleep",
    "stages.",
    "This",
    "comparison",
    "allows",
    "us",
    "to",
    "(1)",
    "estimate",
    "the",
    "complexity",
    "(homogeneity",
    "vs",
    "heterogeneity)",
    "of",
    "sleep",
    "stages",
    "and",
    "(2)",
    "determine",
    "the",
    "degree",
    "of",
    "potential",
    "overlap",
    "between",
    "stages.",
    "If",
    "more",
    "than",
    "1",
    "significant",
    "configuration",
    "emerges",
    "from",
    "the",
    "same",
    "sleep",
    "stage,",
    "this",
    "stage",
    "seems",
    "to",
    "be",
    "heterogeneous.",
    "On",
    "the",
    "other",
    "hand,",
    "if",
    "a",
    "given",
    "configuration",
    "occurs",
    "in",
    "more",
    "than",
    "1",
    "stage,",
    "this",
    "indicates",
    "overlap",
    "between",
    "stages."
  ],
  [
    "The",
    "analysis",
    "was",
    "based",
    "on",
    "32",
    "all-night",
    "sleep",
    "recordings",
    "from",
    "18",
    "women",
    "and",
    "14",
    "men.",
    "The",
    "mean",
    "age",
    "was",
    "50.1",
    "SD",
    "9.3",
    "years",
    "(range:",
    "35-70",
    "years).",
    "The",
    "total",
    "sample",
    "consisted",
    "of",
    "4",
    "groups",
    "of",
    "8",
    "subjects",
    "each,",
    "namely",
    "control",
    "subjects",
    "without",
    "reported",
    "sleep",
    "disturbances",
    "(4",
    "women,",
    "4",
    "men;",
    "mean",
    "age:",
    "56.5",
    "years;",
    "range:",
    "36-70",
    "years)",
    "and",
    "3",
    "groups",
    "of",
    "patients",
    "with",
    "the",
    "following",
    "International",
    "Classification",
    "of",
    "Sleep",
    "Disorders-defined",
    "sleep",
    "disorders:",
    "psychophysiological",
    "insomnia",
    "(5",
    "women,",
    "3",
    "men;",
    "mean",
    "age:",
    "48.4",
    "years;",
    "range:",
    "35-63",
    "years);",
    "obstructive",
    "sleep",
    "apnea",
    "syndrome",
    "(OSA:",
    "4",
    "women,",
    "4",
    "men;",
    "mean",
    "age:",
    "56.1",
    "years;",
    "range:",
    "40-68",
    "years);",
    "and",
    "narcolepsy",
    "(5",
    "women,",
    "3",
    "men;",
    "mean",
    "age:",
    "52.1",
    "years;",
    "range:",
    "35-62",
    "years)..",
    "Polygraphic",
    "sleep",
    "recordings",
    "were",
    "performed",
    "for",
    "7.5",
    "to",
    "8",
    "hours",
    "between",
    "10:00",
    "PM",
    "and",
    "6:30",
    "AM",
    "under",
    "standardized",
    "recording",
    "conditions",
    "in",
    "a",
    "clinical",
    "sleep",
    "lab.",
    "The",
    "following",
    "variables",
    "were",
    "continuously",
    "recorded:",
    "EEG",
    "(F1-A1,",
    "C3-A2,",
    "C4-A1,",
    "O2-A2),",
    "horizontal",
    "electrooculogram,",
    "chin",
    "EMG,",
    "heart",
    "rate,",
    "respiration",
    "(nasal/mouth",
    "flow,",
    "respiratory",
    "effort",
    "of",
    "abdomen",
    "and",
    "chest),",
    "oxygen",
    "saturation",
    "and",
    "EMG",
    "from",
    "right",
    "and",
    "left",
    "m.",
    "tibialis.",
    "For",
    "the",
    "present",
    "analysis,",
    "we",
    "used",
    "1",
    "EEG",
    "channel",
    "(C3-A2)",
    "and",
    "1",
    "EMG",
    "channel",
    "(chin",
    "EMG)..",
    "Digital",
    "sleep",
    "data",
    "were",
    "stored",
    "for",
    "later",
    "analysis,",
    "and",
    "sleep",
    "stages",
    "were",
    "visually",
    "analyzed",
    "in",
    "30-second",
    "segments",
    "(\"epochs\")",
    "according",
    "to",
    "Rechtschaffen",
    "and",
    "Kales",
    "2",
    "criteria.",
    "In",
    "addition,",
    "3",
    "continuous",
    "parameters",
    "were",
    "computed",
    "from",
    "the",
    "recordings,",
    "A,",
    "a",
    "measure",
    "of",
    "the",
    "ratio",
    "of",
    "EEG",
    "alpha",
    "and",
    "slow-wave",
    "activity",
    "19",
    ";",
    "E,",
    "representing",
    "the",
    "point",
    "of",
    "gravity",
    "of",
    "the",
    "EEG",
    "frequency",
    "distribution",
    "(similar",
    "to",
    "Haustein)",
    "4",
    ";",
    "and",
    "R,",
    "a",
    "measure",
    "that",
    "is",
    "based",
    "on",
    "the",
    "momentary",
    "amount",
    "of",
    "phasic",
    "EMG",
    "activity.",
    "20",
    "The",
    "variable",
    "A",
    "is",
    "defined",
    "as",
    "the",
    "ratio",
    "between",
    "alpha",
    "activity",
    "and",
    "the",
    "sum",
    "of",
    "activity",
    "in",
    "the",
    "delta",
    "and",
    "theta",
    "frequency",
    "ranges.",
    "This",
    "ratio",
    "is",
    "expressed",
    "as",
    "follows:.",
    "During",
    "a",
    "transition",
    "from",
    "wakefulness",
    "to",
    "sleep,",
    "the",
    "contribution",
    "of",
    "alpha",
    "decreases",
    "while",
    "that",
    "of",
    "the",
    "slow-wave",
    "frequency",
    "ranges",
    "increases..",
    "E",
    "is",
    "a",
    "continuous",
    "variable",
    "that",
    "is",
    "defined",
    "for",
    "each",
    "30-second",
    "epoch",
    "from",
    "the",
    "EEG",
    "frequency",
    "distribution.",
    "The",
    "amount",
    "of",
    "EEG",
    "activity",
    "in",
    "each",
    "frequency",
    "band",
    "is",
    "defined",
    "by",
    "an",
    "algorithm",
    "that",
    "combines",
    "zero",
    "crossing",
    "for",
    "low",
    "frequencies",
    "(<",
    "4",
    "Hz)",
    "and",
    "peak-topeak",
    "detection",
    "for",
    "higher",
    "frequencies",
    "(>",
    "4",
    "Hz).",
    "The",
    "time",
    "portion",
    "per",
    "30-second",
    "epoch",
    "was",
    "computed",
    "for",
    "each",
    "wavelength.",
    "E",
    "is",
    "defined",
    "by",
    "the",
    "following",
    "formula:"
  ],
  [
    "The",
    "values",
    "for",
    "parameter",
    "E",
    "are",
    "highest",
    "in",
    "waking",
    "and",
    "lowest",
    "in",
    "slow-wave",
    "sleep..",
    "R",
    "was",
    "computed",
    "from",
    "the",
    "m.",
    "mentalis",
    "EMG.",
    "An",
    "EMG",
    "increase",
    "above",
    "a",
    "predefined",
    "threshold",
    "was",
    "scored",
    "as",
    "transient",
    "EMG",
    "activity.",
    "For",
    "each",
    "30-second",
    "epoch,",
    "it",
    "was",
    "determined",
    "whether",
    "or",
    "not",
    "there",
    "was",
    "transient",
    "EMG",
    "activity.",
    "Based",
    "on",
    "this",
    "information,",
    "R",
    "was",
    "computed",
    "as",
    "a",
    "continuous",
    "variable",
    "between",
    "0",
    "and",
    "1.",
    "As",
    "long",
    "as",
    "there",
    "is",
    "no",
    "transient",
    "EMG",
    "activity,",
    "the",
    "parameter",
    "value",
    "decreases",
    "by",
    "a",
    "certain",
    "constant",
    "amount",
    "per",
    "time",
    "unit,",
    "whereas",
    "it",
    "increases",
    "by",
    "a",
    "certain",
    "amount",
    "when",
    "transient",
    "EMG",
    "activity",
    "occurs.",
    "As",
    "a",
    "result,",
    "R",
    "reaches",
    "its",
    "lowest",
    "level",
    "during",
    "long",
    "time",
    "spans",
    "without",
    "transient",
    "EMG",
    "activity,",
    "and",
    "it",
    "reaches",
    "the",
    "upper",
    "level",
    "when",
    "a",
    "series",
    "of",
    "EMG",
    "transients",
    "occurs.",
    "The",
    "amount",
    "for",
    "a",
    "decrease",
    "was",
    "fixed",
    "at",
    "one",
    "third",
    "of",
    "that",
    "for",
    "an",
    "increase,",
    "to",
    "adjust",
    "for",
    "the",
    "different",
    "dynamics",
    "of",
    "EMG",
    "changes",
    "during",
    "descending",
    "(W",
    "→",
    "slow-wave",
    "sleep)",
    "and",
    "ascending",
    "(slow-wave",
    "sleep",
    "→",
    "W",
    "or",
    "S1)",
    "parts",
    "of",
    "the",
    "sleep",
    "cycle.",
    "The",
    "time",
    "course",
    "of",
    "R",
    "values",
    "can",
    "be",
    "graphically",
    "displayed",
    "as",
    "a",
    "time-dependent",
    "variable",
    "(see",
    "Figure",
    "1",
    ").",
    "The",
    "computation",
    "of",
    "the",
    "3",
    "parameters",
    "was",
    "performed",
    "by",
    "a",
    "commercial",
    "sleep",
    "analysis",
    "software",
    "package",
    "(Leonardo;",
    "MKE,",
    "Willroth,",
    "Germany).",
    "Figure",
    "1",
    "represents",
    "a",
    "visually",
    "scored",
    "hypnogram",
    "in",
    "addition",
    "to",
    "the",
    "3",
    "continuous",
    "measures",
    "A,",
    "E",
    "and",
    "R."
  ],
  [
    "For",
    "each",
    "continuous",
    "variable",
    "(A,",
    "E,",
    "R),",
    "1",
    "value",
    "was",
    "computed",
    "for",
    "each",
    "30-second",
    "epoch.",
    "Later,",
    "the",
    "continuous",
    "variables",
    "were",
    "transformed",
    "into",
    "binary",
    "variables",
    "by",
    "separating",
    "the",
    "total",
    "distribution",
    "of",
    "epoch-by-epoch",
    "values",
    "at",
    "the",
    "individual",
    "median.",
    "For",
    "a",
    "given",
    "variable",
    "and",
    "epoch,",
    "a",
    "plus",
    "(+)",
    "was",
    "assigned",
    "if",
    "the",
    "actual",
    "parameter",
    "value",
    "was",
    "above",
    "the",
    "median,",
    "and",
    "a",
    "minus",
    "(-)",
    "if",
    "the",
    "actual",
    "value",
    "was",
    "below",
    "the",
    "median",
    "for",
    "a",
    "given",
    "subject.",
    "The",
    "combination",
    "of",
    "the",
    "3",
    "binary",
    "variables",
    "(A,",
    "E,",
    "R)",
    "results",
    "in",
    "2",
    "3",
    "=",
    "8",
    "different",
    "patterns",
    "(",
    ",",
    "...,",
    "---).",
    "The",
    "first",
    "sign",
    "relates",
    "to",
    "A,",
    "the",
    "second",
    "to",
    "E,",
    "and",
    "the",
    "third",
    "to",
    "R..",
    "In",
    "the",
    "next",
    "step,",
    "a",
    "sleep",
    "stage",
    "and",
    "an",
    "(A,",
    "E,",
    "R)",
    "pattern",
    "were",
    "assigned",
    "to",
    "each",
    "epoch",
    "of",
    "the",
    "sleep",
    "recording.",
    "Finally,",
    "the",
    "frequency",
    "of",
    "occurrence",
    "of",
    "the",
    "8",
    "patterns",
    "was",
    "tabulated",
    "for",
    "each",
    "sleep",
    "stage",
    "and",
    "analyzed",
    "by",
    "CFA.",
    "17,",
    "22",
    "The",
    "CFA",
    "is",
    "a",
    "test",
    "procedure",
    "for",
    "the",
    "analysis",
    "of",
    "multidimensional",
    "contingency",
    "tables.",
    "It",
    "computes",
    "the",
    "probability",
    "of",
    "whether",
    "a",
    "given",
    "pattern",
    "could",
    "be",
    "expected",
    "to",
    "occur",
    "by",
    "chance,",
    "according",
    "to",
    "the",
    "margin",
    "frequency",
    "distributions",
    "of",
    "the",
    "binary",
    "variables",
    "A,",
    "E,",
    "and",
    "R",
    "pattern,",
    "or",
    "whether",
    "it",
    "is",
    "significant,",
    "i.e.,",
    "overrepresented,",
    "for",
    "a",
    "given",
    "sleep",
    "stage.",
    "If",
    "more",
    "than",
    "1",
    "pattern",
    "becomes",
    "significant",
    "for",
    "a",
    "given",
    "sleep",
    "stage,",
    "this",
    "suggests",
    "that",
    "the",
    "stage",
    "contains",
    "different",
    "identifiable",
    "substages.",
    "The",
    "CFA",
    "allows",
    "one",
    "to",
    "define",
    "types,",
    "by",
    "a",
    "statistical",
    "probability",
    "above",
    "the",
    "chosen",
    "level",
    "of",
    "significance,",
    "as",
    "well",
    "as",
    "antitypes,",
    "which",
    "occur",
    "less",
    "frequently",
    "than",
    "expected",
    "by",
    "chance.",
    "In",
    "the",
    "present",
    "case,",
    "the",
    "prediction",
    "CFA",
    "was",
    "performed",
    "with",
    "the",
    "configurations",
    "A,",
    "E,",
    "R",
    "as",
    "predictors",
    "and",
    "with",
    "visually",
    "scored",
    "sleep",
    "stages",
    "as",
    "criteria.",
    "23,",
    "24",
    "For",
    "CFA",
    "statistical",
    "testing,",
    "we",
    "used",
    "the",
    "Fisher",
    "exact",
    "test",
    "for",
    "4-fold",
    "tables.",
    "23",
    "The",
    "level",
    "of",
    "significance",
    "α",
    "was",
    "set",
    "at",
    ".05,",
    "and",
    "the",
    "Holm",
    "method",
    "25",
    "was",
    "applied",
    "to",
    "adjust",
    "α",
    "for",
    "multiple",
    "testing."
  ],
  [
    "The",
    "analysis",
    "was",
    "based",
    "on",
    "32",
    "polysomnographic",
    "recordings",
    "with",
    "a",
    "total",
    "of",
    "28,086",
    "epochs.",
    "The",
    "distribution",
    "of",
    "sleep",
    "stages",
    "was",
    "8.8%",
    "(n",
    "=",
    "2484",
    "epochs)",
    "for",
    "Stage",
    "1,",
    "46.9%",
    "(n",
    "=",
    "13,182)",
    "for",
    "Stage",
    "2,",
    "7.5%",
    "(n",
    "=",
    "2113)",
    "for",
    "Stage",
    "3,",
    "2.1%",
    "(n",
    "=",
    "587)",
    "for",
    "Stage",
    "4,",
    "and",
    "16.5%",
    "(n",
    "=",
    "4,625)",
    "for",
    "REM",
    "sleep.",
    "The",
    "remaining",
    "epochs",
    "were",
    "scored",
    "as",
    "awake",
    "(17.7%,",
    "n",
    "=",
    "4972",
    "epochs),",
    "movement",
    "time",
    "(0.3%,",
    "n",
    "=",
    "79),",
    "or",
    "undefined",
    "(0.2%,",
    "n",
    "=",
    "44",
    "epochs).",
    "There",
    "was",
    "no",
    "definition",
    "of",
    "types",
    "for",
    "movement",
    "time",
    "and",
    "undefined.",
    "Table",
    "1",
    "shows",
    "the",
    "absolute",
    "and",
    "Table",
    "2",
    "the",
    "relative",
    "frequencies",
    "of",
    "the",
    "8",
    "combinations",
    "of",
    "binary",
    "values",
    "for",
    "A,",
    "E,",
    "and",
    "R",
    "per",
    "sleep",
    "stage",
    "for",
    "all",
    "32",
    "sleep",
    "recordings.",
    "The",
    "margin",
    "frequencies",
    "show",
    "that",
    "the",
    "patterns",
    "(n",
    "=",
    "6410,",
    "22.8%)",
    "and",
    "---(n",
    "=",
    "5501,",
    "19.6%)",
    "were",
    "the",
    "most",
    "frequent,",
    "whereas",
    "the",
    "pattern",
    "(n",
    "=",
    "1893,",
    "6.7%)",
    "was",
    "least",
    "frequent..",
    "Those",
    "patterns",
    "identified",
    "by",
    "the",
    "CFA",
    "as",
    "significant",
    "for",
    "the",
    "total",
    "sample",
    "of",
    "32",
    "recordings",
    "are",
    "marked",
    "in",
    "Table",
    "2",
    "..",
    "The",
    "significant",
    "patterns",
    "or",
    "types",
    "for",
    "the",
    "4",
    "groups",
    "of",
    "subjects",
    "are",
    "summarized",
    "in",
    "Table",
    "3",
    ".",
    "As",
    "can",
    "be",
    "seen,",
    "the",
    "majority",
    "of",
    "significant",
    "pattern-to-stage",
    "relationships",
    "applies",
    "to",
    "all",
    "4",
    "groups",
    "of",
    "subjects.",
    "An",
    "identical",
    "pattern-to-stage",
    "relationship",
    "was",
    "found",
    "for",
    "all",
    "4",
    "groups",
    "in",
    "11",
    "cases,",
    "for",
    "3",
    "groups",
    "in",
    "2",
    "cases,",
    "for",
    "2",
    "groups",
    "in",
    "5",
    "cases,",
    "and",
    "for",
    "1",
    "group",
    "in",
    "2",
    "cases.",
    "Given",
    "the",
    "limited",
    "sample",
    "size",
    "of",
    "only",
    "8",
    "sleep",
    "recordings",
    "per",
    "group,",
    "this",
    "suggests",
    "a",
    "rather",
    "stable",
    "pattern-to-stage",
    "relationship,",
    "largely",
    "independent",
    "of",
    "the",
    "specific",
    "pathology",
    "of",
    "the",
    "diagnostic",
    "groups..",
    "Stage",
    "wake",
    "was",
    "characterized",
    "by",
    "a",
    "single",
    "pattern",
    "(",
    ")",
    "with",
    "high",
    "values",
    "for",
    "A,",
    "E,",
    "and",
    "R",
    "in",
    "all",
    "4",
    "groups.",
    "One",
    "additional",
    "pattern",
    "(",
    ")",
    "with",
    "a",
    "low",
    "R",
    "value",
    "became",
    "significant",
    "for",
    "patients",
    "with",
    "insomnia",
    "and",
    "narcolepsy,",
    "and",
    "1",
    "(",
    ")",
    "with",
    "low",
    "A",
    "for",
    "patients",
    "with",
    "OSA..",
    "Stage",
    "1",
    "sleep",
    "exhibited",
    "2",
    "significant",
    "patterns",
    "for",
    "all",
    "groups,",
    "1",
    "with",
    "high",
    "values",
    "in",
    "all",
    "3",
    "variables",
    "(",
    ")",
    "and",
    "1",
    "with",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "A",
    "but",
    "high",
    "values",
    "for",
    "E",
    "and",
    "R",
    "(.",
    ").",
    "This",
    "suggests",
    "2",
    "types",
    "of",
    "Stage",
    "1",
    "sleep,",
    "1",
    "with",
    "more",
    "alpha",
    "activity",
    "(",
    ")",
    "and",
    "1",
    "with",
    "less",
    "alpha",
    "(.",
    ").",
    "An",
    "additional",
    "Stage",
    "1",
    "pattern",
    "with",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "R",
    "(",
    ")",
    "became",
    "significant",
    "only",
    "for",
    "control",
    "subjects",
    "and",
    "patients",
    "with",
    "insomnia..",
    "Stage",
    "2",
    "sleep",
    "turned",
    "out",
    "to",
    "be",
    "heterogeneous,",
    "with",
    "4",
    "significant",
    "patterns",
    "in",
    "all",
    "4",
    "groups.",
    "All",
    "4",
    "patterns",
    "had",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "E",
    "in",
    "common.",
    "Two",
    "patterns",
    "had",
    "a",
    "high",
    "value",
    "for",
    "A",
    "(",
    "and",
    ")",
    "and",
    "2",
    "had",
    "a",
    "low",
    "value",
    "(",
    "and",
    "---),",
    "whereas",
    "the",
    "value",
    "for",
    "R",
    "was",
    "twice",
    "positive",
    "and",
    "twice",
    "negative.",
    "Interestingly,",
    "none",
    "of",
    "the",
    "Stage",
    "2",
    "patterns",
    "overlapped",
    "with",
    "Stage",
    "1",
    "patterns",
    "in",
    "any",
    "of",
    "the",
    "4",
    "groups",
    "of",
    "subjects..",
    "The",
    "main",
    "pattern",
    "for",
    "Stage",
    "3",
    "sleep,",
    "valid",
    "for",
    "all",
    "4",
    "groups,",
    "was",
    "---.",
    "One",
    "additional",
    "pattern",
    "(",
    ")",
    "became",
    "significant",
    "for",
    "3",
    "groups",
    "(insomnia,",
    "OSA,",
    "narcolepsy),",
    "and",
    "1",
    "other",
    "(",
    ")",
    "for",
    "2",
    "groups",
    "(OSA,",
    "narcolepsy).",
    "All",
    "3",
    "patterns",
    "were",
    "characterized",
    "by",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "E,",
    "and",
    "2",
    "of",
    "them",
    "by",
    "an",
    "additionally",
    "low",
    "value",
    "for",
    "A",
    "or",
    "R,",
    "respectively..",
    "Stage",
    "4",
    "sleep",
    "displayed",
    "the",
    "same",
    "pattern",
    "configuration",
    "as",
    "Stage",
    "3.",
    "Again,",
    "the",
    "pattern",
    "---was",
    "typical",
    "for",
    "all",
    "4",
    "groups,",
    "whereas",
    "the",
    "remaining",
    "2",
    "patterns",
    "were",
    "significant",
    "for",
    "either",
    "2",
    "groups",
    "(",
    ":",
    "OSA",
    "and",
    "narcolepsy)",
    "or",
    "only",
    "1",
    "group",
    "(",
    ":",
    "insomnia)..",
    "REM",
    "sleep",
    "was",
    "characterized",
    "by",
    "4",
    "significant",
    "patterns.",
    "All",
    "4",
    "had",
    "a",
    "high",
    "value",
    "for",
    "the",
    "EEG",
    "parameter",
    "E.",
    "Two",
    "of",
    "these",
    "were",
    "also",
    "high",
    "for",
    "A,",
    "whereas",
    "R",
    "was",
    "either",
    "high",
    "or",
    "low",
    "(",
    "and",
    ").",
    "The",
    "remaining",
    "2",
    "patterns",
    "were",
    "low",
    "for",
    "A",
    "but",
    "differed",
    "for",
    "the",
    "R",
    "value",
    "(",
    "and",
    ").",
    "The",
    "latter",
    "2",
    "patterns",
    "were",
    "significant",
    "for",
    "all",
    "4",
    "groups",
    "whereas",
    "the",
    "other",
    "2",
    "patterns",
    "were",
    "significant",
    "for",
    "3",
    "groups",
    "each",
    "(",
    "for",
    "controls,",
    "OSA,",
    "and",
    "narcolepsy;",
    "for",
    "controls,",
    "insomnia,",
    "and",
    "OSA).",
    "Representative",
    "examples",
    "for",
    "each",
    "type",
    "are",
    "shown",
    "in",
    "Figure",
    "2",
    "..",
    "Overall,",
    "76.8%",
    "of",
    "all",
    "epochs",
    "fitted",
    "into",
    "significant",
    "patterns.",
    "The",
    "value",
    "was",
    "highest",
    "for",
    "Stage",
    "3",
    "(86.2%)",
    "and",
    "lowest",
    "for",
    "Stage",
    "1",
    "(68.3%)",
    "sleep.",
    "The",
    "4",
    "subject",
    "groups",
    "differed",
    "only",
    "slightly",
    "in",
    "the",
    "total",
    "number",
    "of",
    "epochs",
    "fitting",
    "into",
    "significant",
    "AER",
    "patterns.",
    "The",
    "percentage",
    "was",
    "highest",
    "for",
    "OSA",
    "(80.3%)",
    "and",
    "lowest",
    "for",
    "patients",
    "with",
    "narcolepsy",
    "(74.5%)..",
    "Beside",
    "types,",
    "the",
    "CFA",
    "also",
    "allows",
    "one",
    "to",
    "define",
    "antitypes.",
    "Antitypes",
    "are",
    "those",
    "patterns",
    "that",
    "occur",
    "significantly",
    "less",
    "frequently",
    "than",
    "would",
    "be",
    "expected",
    "according",
    "to",
    "the",
    "margin",
    "frequencies.",
    "In",
    "the",
    "present",
    "analysis,",
    "a",
    "pattern",
    "was",
    "accepted",
    "as",
    "an",
    "antitype",
    "only",
    "if",
    "its",
    "probability",
    "was",
    "less",
    "than",
    "0.05",
    "and",
    "if",
    "this",
    "was",
    "the",
    "case",
    "in",
    "all",
    "4",
    "groups.",
    "Using",
    "this",
    "criterion,",
    "20",
    "patterns",
    "could",
    "be",
    "defined",
    "as",
    "antitypes",
    "(see",
    "Table",
    "4",
    "Table",
    "3",
    ")",
    "and",
    "of",
    "20",
    "antitypes",
    "(see",
    "Table",
    "4",
    ").",
    "The",
    "remaining",
    "8",
    "fields",
    "are",
    "neutral,",
    "ie,",
    "they",
    "may",
    "either",
    "hold",
    "this",
    "status",
    "in",
    "future",
    "studies",
    "with",
    "larger",
    "samples",
    "or",
    "they",
    "may",
    "shift",
    "in",
    "the",
    "direction",
    "of",
    "types",
    "or",
    "antitypes.",
    "The",
    "percentage",
    "of",
    "epochs",
    "in",
    "fields",
    "with",
    "antitypes",
    "was",
    "quite",
    "low",
    "across",
    "all",
    "4",
    "groups",
    "of",
    "subjects,",
    "namely",
    "1.6%",
    "for",
    "wake,",
    "5.1%",
    "for",
    "Stage",
    "1,",
    "18.0%",
    "for",
    "Stage",
    "2,",
    "1.2%",
    "for",
    "Stage",
    "3,",
    "0%",
    "for",
    "Stage",
    "4",
    "and",
    "10.5%",
    "for",
    "REM",
    "sleep."
  ],
  [
    "The",
    "present",
    "results",
    "call",
    "attention",
    "to",
    "the",
    "structural",
    "complexity",
    "of",
    "sleep",
    "stages.",
    "The",
    "statistical",
    "analysis",
    "revealed",
    "that",
    "visually",
    "scored",
    "sleep",
    "stages",
    "are",
    "not",
    "homogeneous",
    "units",
    "but,",
    "rather,",
    "agglomerations",
    "of",
    "different",
    "significant",
    "patterns,",
    "called",
    "types,",
    "that",
    "in",
    "the",
    "present",
    "study",
    "were",
    "based",
    "on",
    "a",
    "set",
    "of",
    "3",
    "physiologic",
    "variables",
    "representing",
    "aspects",
    "of",
    "the",
    "momentary",
    "EEG",
    "and",
    "EMG",
    "activity.",
    "The",
    "decomposition",
    "of",
    "sleep",
    "stages",
    "into",
    "types",
    "by",
    "the",
    "prediction",
    "CFA",
    "resulted",
    "in",
    "fairly",
    "comparable",
    "solutions",
    "for",
    "the",
    "various",
    "diagnostic",
    "groups.",
    "This",
    "is",
    "in",
    "agreement",
    "with",
    "the",
    "experience",
    "gained",
    "from",
    "clinical",
    "sleep",
    "research,",
    "which",
    "shows",
    "that",
    "sleep",
    "recordings",
    "from",
    "different",
    "diagnostic",
    "groups",
    "can",
    "be",
    "analyzed",
    "with",
    "the",
    "same",
    "scoring",
    "system."
  ],
  [
    "Sleep",
    "stages",
    "contained",
    "more",
    "than",
    "1",
    "type,",
    "indicating",
    "a",
    "physiological",
    "heterogeneity",
    "of",
    "sleep",
    "stages.",
    "The",
    "least-complex",
    "stages",
    "were",
    "wakefulness",
    "and",
    "Stage",
    "4;",
    "the",
    "most",
    "complex",
    "were",
    "Stage",
    "2",
    "and",
    "REM",
    "sleep.",
    "Each",
    "of",
    "the",
    "latter",
    "2",
    "sleep",
    "stages",
    "was",
    "composed",
    "of",
    "4",
    "different",
    "types,",
    "which",
    "did",
    "not",
    "significantly",
    "overlap",
    "between",
    "these",
    "2",
    "stages..",
    "Wakefulness",
    "was",
    "characterized",
    "in",
    "all",
    "4",
    "groups",
    "by",
    "type",
    "AER/",
    ",",
    "with",
    "high",
    "values",
    "for",
    "all",
    "3",
    "parameters.",
    "The",
    "additional",
    "occurrence",
    "of",
    "patients",
    "with",
    "insomnia",
    "and",
    "narcolepsy",
    "on",
    "the",
    "neighboring",
    "type",
    ",",
    "and",
    "of",
    "patients",
    "with",
    "OSA",
    "on",
    "type",
    "AER/",
    ",",
    "needs",
    "replication",
    "with",
    "larger",
    "samples",
    "before",
    "they",
    "can",
    "be",
    "taken",
    "for",
    "granted..",
    "Whereas",
    "Stage",
    "1",
    "sleep",
    "and",
    "stage",
    "wake",
    "had",
    "type",
    "AER/",
    "in",
    "common,",
    "Stage",
    "1",
    "sleep",
    "displayed",
    "AER/",
    "as",
    "a",
    "second",
    "type",
    "in",
    "all",
    "4",
    "groups.",
    "This",
    "shows",
    "that",
    "a",
    "reduction",
    "of",
    "alpha",
    "and",
    "a",
    "shift",
    "to",
    "EEG",
    "slow-wave",
    "activity,",
    "resulting",
    "in",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "parameter",
    "A,",
    "is",
    "typical",
    "of",
    "a",
    "significant",
    "proportion",
    "of",
    "stage",
    "1",
    "epochs.",
    "The",
    "additional",
    "pattern",
    "AER/",
    ",",
    "characterized",
    "by",
    "low",
    "phasic",
    "EMG",
    "activity,",
    "again",
    "was",
    "significant",
    "only",
    "for",
    "patients",
    "with",
    "insomnia",
    "and",
    "control",
    "subjects.",
    "This",
    "may",
    "indicate",
    "fewer",
    "stage",
    "1",
    "movement",
    "arousals",
    "near",
    "the",
    "onset",
    "of",
    "sleep",
    "for",
    "the",
    "control",
    "and",
    "insomnia",
    "groups",
    "compared",
    "with",
    "patients",
    "in",
    "the",
    "OSA",
    "and",
    "narcolepsy",
    "groups.",
    "26",
    "The",
    "present",
    "results",
    "underline",
    "the",
    "position",
    "of",
    "Stage",
    "1",
    "as",
    "a",
    "transitional",
    "stage",
    "that",
    "shares",
    "the",
    "same",
    "AER",
    "types",
    "with",
    "stage",
    "wake",
    "but",
    "with",
    "different",
    "proportions",
    "of",
    "these",
    "types",
    "(see",
    "Table",
    "2",
    ")..",
    "As",
    "opposed",
    "to",
    "the",
    "noticeable",
    "overlap",
    "of",
    "types",
    "in",
    "stages",
    "wake",
    "and",
    "1,",
    "Stage",
    "2",
    "was",
    "characterized",
    "by",
    "4",
    "new",
    "types.",
    "All",
    "Stage",
    "2",
    "types",
    "had",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "parameter",
    "E",
    "in",
    "common,",
    "indicating",
    "a",
    "definite",
    "shift",
    "to",
    "lower",
    "EEG",
    "frequencies.",
    "The",
    "other",
    "2",
    "parameters,",
    "A",
    "and",
    "R,",
    "were",
    "either",
    "high",
    "or",
    "low.",
    "The",
    "presence",
    "of",
    "4",
    "AER",
    "types",
    "in",
    "all",
    "diagnostic",
    "groups",
    "suggests",
    "that",
    "Stage",
    "2,",
    "which",
    "occupies",
    "about",
    "50%",
    "of",
    "total",
    "sleep",
    "time,",
    "is",
    "a",
    "broadly",
    "defined",
    "heterogeneous",
    "sleep",
    "state.",
    "27",
    "In",
    "an",
    "early",
    "study,",
    "Sträle",
    "(see",
    "Lairy",
    "11",
    ")",
    "differentiated",
    "between",
    "3",
    "Stage",
    "2",
    "EEG",
    "patterns",
    "with",
    "the",
    "following",
    "characteristics:",
    "(1)",
    "epochs",
    "with",
    "fewer",
    "than",
    "4",
    "sleep",
    "spindles,",
    "as",
    "well",
    "as",
    "moderate",
    "delta",
    "activity;",
    "(2)",
    "epochs",
    "with",
    "fairly",
    "low-voltage",
    "mixed-frequency",
    "EEG",
    "with",
    "4",
    "to",
    "8",
    "spindles;",
    "and",
    "(3)",
    "Stage",
    "2",
    "epochs",
    "with",
    "a",
    "maximum",
    "amount",
    "of",
    "slow",
    "activity.",
    "Sträle",
    "observed",
    "a",
    "specific",
    "chronologic",
    "distribution",
    "of",
    "the",
    "different",
    "types",
    "with",
    "a",
    "preference",
    "for",
    "the",
    "second",
    "type",
    "of",
    "Stage",
    "2",
    "later",
    "in",
    "the",
    "night.",
    "A",
    "specific",
    "chronologic",
    "distribution",
    "with",
    "increasing",
    "sleep-spindle",
    "activity",
    "during",
    "sleep,",
    "and",
    "a",
    "reciprocal",
    "relationship",
    "with",
    "EEG",
    "slow-wave",
    "activity,",
    "was",
    "later",
    "evaluated",
    "more",
    "systematically",
    "by",
    "others",
    "using",
    "digital",
    "data-analysis",
    "techniques.",
    "28",
    "Comparing",
    "the",
    "present",
    "types",
    "of",
    "Stage",
    "2",
    "with",
    "those",
    "defined",
    "by",
    "Sträle,",
    "his",
    "type",
    "c",
    "may",
    "correspond",
    "with",
    "the",
    "types",
    "AER/",
    "and",
    "---,",
    "which",
    "differ",
    "only",
    "in",
    "phasic",
    "EMG",
    "activity.",
    "In",
    "future",
    "studies,",
    "it",
    "would",
    "be",
    "of",
    "interest",
    "to",
    "analyze",
    "the",
    "relationship",
    "of",
    "the",
    "present",
    "types",
    "of",
    "Stage",
    "2",
    "sleep",
    "with",
    "autonomic",
    "and",
    "hormone",
    "data,",
    "since",
    "Brandenberger",
    "et",
    "al,",
    "16",
    "who",
    "analyzed",
    "such",
    "data,",
    "presented",
    "evidence",
    "for",
    "a",
    "quiet",
    "type",
    "of",
    "Stage",
    "2,",
    "preceding",
    "slow-wave",
    "sleep,",
    "and",
    "an",
    "active",
    "type",
    "that",
    "precedes",
    "REM",
    "sleep..",
    "Molinari",
    "and",
    "Foulkes'",
    "12",
    "distinction",
    "between",
    "tonic",
    "and",
    "phasic",
    "NREM",
    "sleep",
    "corresponds",
    "with",
    "the",
    "4",
    "types",
    "in",
    "sleep",
    "Stage",
    "2",
    "of",
    "the",
    "present",
    "analysis,",
    "2",
    "of",
    "them",
    "with",
    "phasic",
    "EMG",
    "activity",
    "(AER/",
    "and",
    ")",
    "and",
    "2",
    "without",
    "(AER/",
    "and",
    "---).",
    "Thus,",
    "Stage",
    "2",
    "seems",
    "to",
    "be",
    "a",
    "composite",
    "state",
    "with",
    "consistently",
    "low-frequency",
    "background",
    "EEG",
    "(low",
    "parameter",
    "values",
    "for",
    "E)",
    "activity,",
    "but",
    "fluctuations",
    "of",
    "the",
    "alpha",
    "to",
    "slow-wave",
    "ratio",
    "(parameter",
    "A",
    "either",
    "or",
    "-),",
    "and",
    "of",
    "tonic",
    "versus",
    "phasic",
    "EMG",
    "activity",
    "(parameter",
    "R",
    "either",
    "or",
    "-).",
    "29",
    "The",
    "type",
    "AER/",
    "---continued",
    "into",
    "deep",
    "NREM",
    "sleep",
    "and",
    "was",
    "the",
    "core",
    "type",
    "for",
    "all",
    "4",
    "groups",
    "in",
    "sleep",
    "Stages",
    "3",
    "and",
    "4.",
    "As",
    "opposed",
    "to",
    "the",
    "group",
    "of",
    "healthy",
    "controls,",
    "all",
    "3",
    "patient",
    "groups",
    "had",
    "an",
    "additional",
    "significant",
    "pattern",
    "(AER/",
    ")",
    "in",
    "Stage",
    "3,",
    "which",
    "persisted",
    "in",
    "patients",
    "with",
    "OSA",
    "and",
    "narcolepsy",
    "even",
    "in",
    "stage",
    "4.",
    "This",
    "finding,",
    "which",
    "awaits",
    "confirmation,",
    "suggests",
    "that",
    "patients",
    "with",
    "sleep",
    "disorders",
    "(as",
    "opposed",
    "to",
    "healthy",
    "persons)",
    "have",
    "a",
    "significant",
    "subset",
    "of",
    "epochs",
    "in",
    "Stages",
    "3",
    "and",
    "4,",
    "with",
    "a",
    "high",
    "EEG",
    "alpha",
    "to",
    "slow-wave",
    "ratio",
    "(parameter",
    "A",
    ").",
    "An",
    "analysis",
    "of",
    "the",
    "chronologic",
    "sequence",
    "of",
    "appearance",
    "of",
    "types",
    "is",
    "also",
    "needed",
    "to",
    "evaluate",
    "whether",
    "the",
    "AER",
    "types",
    "and",
    "in",
    "deep",
    "NREM",
    "sleep",
    "(see",
    "Table",
    "3",
    ")",
    "represent",
    "transitional",
    "patterns",
    "that",
    "may",
    "be",
    "located",
    "preferentially",
    "near",
    "the",
    "onset",
    "or",
    "the",
    "end",
    "of",
    "slow-wave",
    "sleep..",
    "REM",
    "sleep",
    "turned",
    "out",
    "to",
    "be",
    "a",
    "complex",
    "state",
    "with",
    "4",
    "types.",
    "In",
    "contrast",
    "with",
    "the",
    "AER",
    "types",
    "of",
    "NREM",
    "sleep,",
    "all",
    "AER",
    "types",
    "of",
    "REM",
    "sleep",
    "had",
    "a",
    "high",
    "value",
    "for",
    "parameter",
    "E",
    "in",
    "common,",
    "indicating",
    "a",
    "high-frequency",
    "EEG.",
    "Whereas",
    "the",
    "two",
    "types",
    "with",
    "low",
    "Taxonomical",
    ".",
    "Configural",
    "frequency",
    "analysis",
    "was",
    "used",
    "to",
    "defined",
    "types",
    "of",
    "activity-A",
    "refers",
    "to",
    "alpha",
    "slow-wave",
    "index",
    ";",
    "E,",
    "electroencephalogram",
    "parameter;",
    "R,",
    "Rest",
    "Index;",
    "S1,",
    "R",
    "represent",
    "tonic",
    "REM",
    "sleep,",
    "the",
    "2",
    "types",
    "with",
    "high",
    "R",
    "represent",
    "phasic",
    "REM",
    "sleep.",
    "12",
    "Two",
    "of",
    "the",
    "4",
    "types",
    "in",
    "REM",
    "sleep",
    "occurred",
    "in",
    "all",
    "patient",
    "groups,",
    "indicating",
    "prototypes",
    "of",
    "REM-sleep",
    "patterning",
    "(AER/",
    "and",
    ").",
    "Type",
    "AER/",
    "was",
    "significant",
    "for",
    "3",
    "groups",
    "(controls,",
    "insomnia",
    "and",
    "OSA),",
    "sparing",
    "the",
    "group",
    "of",
    "patients",
    "with",
    "narcolepsy.",
    "A",
    "closer",
    "inspection",
    "of",
    "frequency",
    "distributions",
    "of",
    "the",
    "different",
    "types",
    "in",
    "REM",
    "sleep",
    "showed",
    "that,",
    "in",
    "contrast",
    "with",
    "the",
    "other",
    "3",
    "groups,",
    "in",
    "patients",
    "with",
    "narcolepsy,",
    "type",
    "was",
    "clearly",
    "more",
    "frequent",
    "than",
    "type",
    ",",
    "suggesting",
    "a",
    "higher",
    "rate",
    "of",
    "phasic",
    "EMG",
    "activity",
    "in",
    "REM",
    "sleep",
    "of",
    "narcoleptic",
    "patients.",
    "This",
    "is",
    "in",
    "agreement",
    "with",
    "results",
    "by",
    "Geisler",
    "et",
    "al,",
    "30",
    "who",
    "found",
    "higher",
    "rates",
    "of",
    "phasic",
    "EMG",
    "activity",
    "in",
    "narcoleptic",
    "patients",
    "than",
    "in",
    "healthy",
    "controls..",
    "In",
    "summary,",
    "the",
    "present",
    "results",
    "suggest",
    "that",
    "sleep",
    "stages",
    "are",
    "not",
    "homogeneous",
    "units",
    "but",
    "represent",
    "an",
    "aggregation",
    "of",
    "different",
    "substates",
    "or",
    "types.",
    "Additionally,",
    "the",
    "analysis",
    "showed",
    "that",
    "the",
    "basic",
    "structure",
    "of",
    "sleep,",
    "defined",
    "by",
    "types,",
    "is",
    "similar",
    "for",
    "normal",
    "sleepers",
    "and",
    "for",
    "patients",
    "with",
    "different",
    "sleep",
    "pathologies.",
    "This",
    "is",
    "in",
    "line",
    "with",
    "the",
    "clinical",
    "experience",
    "that",
    "sleep",
    "stages,",
    "as",
    "defined",
    "for",
    "normal",
    "adult",
    "sleepers,",
    "31",
    "are",
    "also",
    "used",
    "routinely",
    "for",
    "the",
    "analysis",
    "of",
    "patients",
    "with",
    "sleep",
    "disturbances.",
    "Future",
    "studies",
    "will",
    "show",
    "whether",
    "the",
    "observed",
    "differences",
    "between",
    "diagnostic",
    "groups",
    "are",
    "actually",
    "valid",
    "or",
    "whether",
    "they",
    "merely",
    "resulted",
    "from",
    "limited",
    "sample",
    "sizes",
    "in",
    "the",
    "4",
    "groups."
  ],
  [
    "The",
    "types",
    "from",
    "Table",
    "3",
    "can",
    "also",
    "be",
    "depicted",
    "as",
    "8",
    "compartments",
    "of",
    "a",
    "cube,",
    "with",
    "the",
    "axes",
    "A,",
    "E,",
    "and",
    "R,",
    "bisected",
    "(",
    "/-)",
    "on",
    "each",
    "side",
    "(see",
    "Figure",
    "3)",
    ".",
    "In",
    "this",
    "figure",
    "The",
    "3-dimensional",
    "representation",
    "of",
    "types",
    "shows",
    "apparent",
    "similarities",
    "to",
    "Hobson's",
    "3-dimensional",
    "AIM",
    "model,",
    "32",
    "with",
    "the",
    "3",
    "dimensions",
    "of",
    "low",
    "versus",
    "high",
    "activation",
    "(A),",
    "internal",
    "versus",
    "external",
    "orientation",
    "(I),",
    "and",
    "aminergic",
    "versus",
    "cholinergic",
    "modulation",
    "(M).",
    "If",
    "the",
    "2",
    "models",
    "were",
    "placed",
    "to",
    "coincide,",
    "the",
    "present",
    "variables",
    "of",
    "A,",
    "E,",
    "and",
    "R",
    "would",
    "correspond",
    "with",
    "the",
    "dimensions",
    "of",
    "internal/external",
    "(I),",
    "low/high",
    "activation",
    "(A),",
    "and",
    "aminergic/cholinergic",
    "modulation",
    "(M),",
    "respectively.",
    "The",
    "assumed",
    "compatibility",
    "suggests",
    "that",
    "both",
    "models",
    "represent",
    "basic",
    "dimensions",
    "of",
    "sleep",
    "organization.",
    "This",
    "being",
    "the",
    "case,",
    "one",
    "would",
    "expect",
    "a",
    "comparable",
    "outcome",
    "should",
    "the",
    "present",
    "input",
    "variables",
    "be",
    "replaced",
    "by",
    "other",
    "physiologic",
    "measures",
    "such",
    "as",
    "autonomic",
    "variables..",
    "A",
    "special",
    "feature",
    "of",
    "the",
    "CFA",
    "is",
    "that",
    "it",
    "defines",
    "not",
    "only",
    "types,",
    "but",
    "antitypes",
    "as",
    "well.",
    "The",
    "interpretation",
    "of",
    "antitypes",
    "warrants",
    "some",
    "caution,",
    "since",
    "the",
    "independence",
    "of",
    "types",
    "and",
    "antitypes",
    "has",
    "been",
    "questioned.",
    "33",
    "However,",
    "Netter",
    "24",
    "has",
    "emphasized",
    "that",
    "types",
    "and",
    "antitypes",
    "can",
    "be",
    "interpreted",
    "independently",
    "if",
    "the",
    "data",
    "are",
    "embedded",
    "not",
    "in",
    "2",
    "×",
    "2",
    "but",
    "in",
    "larger",
    "r",
    "×",
    "c",
    "tables.",
    "The",
    "distribution",
    "of",
    "antitypes",
    "was",
    "quite",
    "obvious",
    "in",
    "the",
    "present",
    "analysis.",
    "Stage",
    "wake",
    "contained",
    "3",
    "antitypes",
    "(AER/",
    ",",
    ",",
    "and",
    "---).",
    "Two",
    "of",
    "them",
    "were",
    "also",
    "significant",
    "for",
    "Stage",
    "1.",
    "All",
    "3",
    "antitypes",
    "had",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "E,",
    "i.e.,",
    "low",
    "EEG",
    "frequency,",
    "which",
    "is",
    "quite",
    "untypical",
    "of",
    "these",
    "stages.",
    "In",
    "contrast,",
    "Stages",
    "2,",
    "3,",
    "and",
    "4",
    "showed",
    "4",
    "antitypes,",
    "all",
    "with",
    "a",
    "high",
    "value",
    "for",
    "E.",
    "Finally,",
    "all",
    "4",
    "antitypes",
    "observed",
    "in",
    "REM",
    "sleep",
    "(AER/",
    ",",
    ",",
    "and",
    "---)",
    "were",
    "characterized",
    "by",
    "a",
    "low",
    "value",
    "for",
    "E,",
    "again",
    "indicating",
    "a",
    "low-frequency",
    "EEG,",
    "which",
    "is",
    "untypical",
    "of",
    "REM",
    "sleep.",
    "In",
    "summary,",
    "the",
    "observed",
    "antitypes",
    "represent",
    "those",
    "patterns",
    "of",
    "physiologic",
    "input",
    "variables",
    "that",
    "are",
    "very",
    "unlikely",
    "to",
    "occur",
    "in",
    "these",
    "states."
  ],
  [
    "The",
    "present",
    "analysis",
    "began",
    "with",
    "3",
    "continuous",
    "physiologic",
    "variables",
    "(A,",
    "E,",
    "and",
    "R),",
    "which",
    "were",
    "then",
    "split",
    "into",
    "dichotomous",
    "entities",
    "for",
    "further",
    "statistical",
    "analysis",
    "by",
    "the",
    "CFA",
    "technique.",
    "This",
    "back",
    "projection",
    "of",
    "continuous",
    "variables",
    "into",
    "discrete",
    "states",
    "or",
    "stages",
    "touches",
    "upon",
    "a",
    "crucial",
    "question",
    "of",
    "sleep",
    "research,",
    "namely,",
    "how",
    "best",
    "to",
    "describe",
    "the",
    "sleep",
    "process",
    "as",
    "such.",
    "In",
    "the",
    "era",
    "of",
    "analog",
    "signal",
    "recording,",
    "sleep",
    "staging",
    "was",
    "the",
    "single",
    "most",
    "reasonable",
    "and",
    "economic",
    "procedure",
    "for",
    "analyzing",
    "sleep",
    "data.",
    "1,",
    "2",
    "With",
    "the",
    "introduction",
    "of",
    "digital",
    "data",
    "recording",
    "and",
    "storage,",
    "alternative",
    "solutions",
    "became",
    "available.",
    "Today",
    "a",
    "wealth",
    "of",
    "algorithms",
    "is",
    "available,",
    "allowing",
    "any",
    "kind",
    "of",
    "signal",
    "analysis",
    "(from",
    "microscopic",
    "to",
    "macroscopic)",
    "of",
    "sleep",
    "data.",
    "Sleep",
    "staging",
    "was",
    "driven",
    "by",
    "the",
    "concept",
    "that",
    "sleep",
    "can",
    "be",
    "subdivided",
    "into",
    "different",
    "states",
    "(REM",
    "and",
    "NREM)",
    "and",
    "stages",
    "within",
    "NREM",
    "sleep,",
    "implying",
    "specific",
    "regulatory",
    "mechanisms.",
    "31",
    "Many",
    "recent",
    "computerized",
    "procedures",
    "for",
    "sleep",
    "analysis",
    "represent",
    "hybrid",
    "systems,",
    "first",
    "separating",
    "the",
    "sleep",
    "process",
    "into",
    "NREM",
    "and",
    "REM",
    "sleep",
    "states,",
    "then",
    "analyzing",
    "NREM",
    "sleep",
    "as",
    "a",
    "Continuum.",
    "18",
    "The",
    "results",
    "of",
    "the",
    "present",
    "statistical",
    "analysis",
    "shed",
    "light",
    "on",
    "the",
    "following",
    "3",
    "aspects",
    "of",
    "sleep",
    "structure:",
    "(1)",
    "Sleep",
    "stages",
    "are",
    "constituted",
    "by",
    "discrete",
    "substates",
    "(types);",
    "(2)",
    "The",
    "substates",
    "or",
    "types",
    "overlap",
    "between",
    "Stages",
    "wake,",
    "1,",
    "and",
    "REM",
    "and",
    "between",
    "NREM",
    "Stages",
    "2,",
    "3,",
    "and",
    "4,",
    "without",
    "significant",
    "overlap",
    "between",
    "these",
    "2",
    "clusters",
    "of",
    "states;",
    "(3)",
    "although",
    "normal",
    "sleepers",
    "and",
    "sleep",
    "disorder",
    "patients",
    "displayed",
    "basically",
    "the",
    "same",
    "structure",
    "of",
    "substates,",
    "there",
    "appeared",
    "some",
    "specific",
    "group",
    "differences,",
    "which",
    "still",
    "need",
    "confirmation..",
    "The",
    "present",
    "analysis",
    "has",
    "various",
    "limitations",
    "and",
    "thus",
    "can",
    "only",
    "constitute",
    "a",
    "first",
    "step",
    "in",
    "the",
    "direction",
    "of",
    "a",
    "taxonomic",
    "classification",
    "of",
    "sleep.",
    "First,",
    "the",
    "3",
    "input",
    "variables",
    "of",
    "A,",
    "E,",
    "and",
    "R",
    "were",
    "selected",
    "from",
    "a",
    "pragmatic",
    "point",
    "of",
    "view,",
    "since",
    "the",
    "continuous",
    "variables",
    "were",
    "computed",
    "on",
    "a",
    "routine",
    "basis",
    "in",
    "our",
    "lab",
    "and,",
    "thus,",
    "were",
    "available",
    "for",
    "all",
    "subjects.",
    "Additionally,",
    "because",
    "A",
    "and",
    "E",
    "are",
    "both",
    "EEGderived",
    "parameters,",
    "the",
    "information",
    "content",
    "of",
    "these",
    "2",
    "variables",
    "may",
    "overlap",
    "to",
    "a",
    "certain",
    "extent.",
    "Other",
    "continuous",
    "variables",
    "might",
    "be",
    "used",
    "in",
    "future",
    "studies.",
    "Second,",
    "dichotomization",
    "of",
    "the",
    "input",
    "variables",
    "at",
    "the",
    "individual",
    "median",
    "admittedly",
    "coarsens",
    "their",
    "distribution.",
    "Due",
    "to",
    "this",
    "methodologic",
    "restriction,",
    "variability",
    "within",
    "each",
    "variable",
    "is",
    "largely",
    "reduced.",
    "This",
    "may",
    "have",
    "contributed",
    "to",
    "the",
    "substantial",
    "overlap",
    "of",
    "patterns",
    "in",
    "sleep",
    "stages",
    "2,",
    "3,",
    "and",
    "4.",
    "Trisecting",
    "the",
    "input",
    "variables",
    "as",
    "an",
    "alternative",
    "procedure,",
    "which",
    "would",
    "allow",
    "a",
    "finer",
    "grading",
    "of",
    "the",
    "input",
    "variables,",
    "has",
    "the",
    "disadvantage",
    "of",
    "resulting",
    "in",
    "27",
    "different",
    "patterns",
    "for",
    "only",
    "3",
    "variables.",
    "In",
    "this",
    "case,",
    "a",
    "very",
    "large",
    "number",
    "of",
    "sleep",
    "recordings",
    "would",
    "be",
    "needed",
    "for",
    "statistical",
    "testing..",
    "The",
    "taxonomic",
    "analysis",
    "of",
    "multiple",
    "physiologic",
    "processes",
    "in",
    "sleep",
    "uncovered",
    "stable",
    "pattern",
    "configurations",
    "beyond",
    "the",
    "level",
    "of",
    "sleep",
    "stages.",
    "Thus,",
    "the",
    "CFA",
    "represents",
    "an",
    "analytic",
    "procedure",
    "that",
    "allows",
    "one",
    "to",
    "study",
    "the",
    "internal",
    "structure",
    "of",
    "sleep",
    "stages",
    "and",
    "transitions",
    "between",
    "stages."
  ],
  [
    "A",
    "taxonomic",
    "analysis",
    "of",
    "sleep",
    "stages."
  ],
  [
    "Study",
    "Objectives:",
    "To",
    "study",
    "the",
    "structure",
    "of",
    "human",
    "sleep",
    "at",
    "the",
    "level",
    "of",
    "sleep",
    "stages.",
    "We",
    "applied",
    "taxonomic",
    "statistics",
    "to",
    "detect",
    "significant",
    "configurations",
    "(types)",
    "of",
    "different",
    "physiologic",
    "variables",
    "and",
    "their",
    "relationship",
    "to",
    "sleep",
    "stages.",
    "Design",
    "and",
    "Statistics:",
    "Polygraphic",
    "sleep",
    "recordings",
    "from",
    "32",
    "subjects",
    "(normal",
    "sleepers",
    "as",
    "well",
    "as",
    "patients",
    "with",
    "insomnia,",
    "sleep",
    "apnea,",
    "or",
    "narcolepsy;",
    "n",
    "=",
    "8",
    "per",
    "group)",
    "were",
    "visually",
    "scored",
    "and",
    "submitted",
    "to",
    "a",
    "configural",
    "frequency",
    "analysis.",
    "The",
    "configural",
    "frequency",
    "analysis",
    "was",
    "computed",
    "with",
    "3",
    "continuous",
    "input",
    "variables:",
    "an",
    "electroencephalogram",
    "parameter,",
    "which",
    "represents",
    "the",
    "point",
    "of",
    "gravity",
    "of",
    "the",
    "EEG",
    "frequency",
    "distribution;",
    "the",
    "alpha",
    "slow-wave",
    "index,",
    "and",
    "the",
    "Rest",
    "Index,",
    "based",
    "on",
    "the",
    "presence",
    "or",
    "absence",
    "of",
    "phasic",
    "electromyographic",
    "activity.",
    "These",
    "variables",
    "were",
    "dichotomized",
    "for",
    "further",
    "analysis.",
    "The",
    "combination",
    "of",
    "2",
    "levels",
    "(+",
    "or",
    "-)",
    "and",
    "3",
    "variables",
    "resulted",
    "in",
    "2",
    "3",
    "patterns",
    "(+++",
    "to",
    "-",
    "-",
    "-).",
    "The",
    "configural",
    "frequency",
    "analysis",
    "is",
    "a",
    "nonparametric",
    "X",
    "2",
    "-type",
    "multivariate",
    "statistic",
    "that",
    "identifies",
    "significant",
    "patterns",
    "or",
    "types.",
    "Results:",
    "Each",
    "sleep",
    "stage",
    "contained",
    "3",
    "or",
    "4",
    "types.",
    "For",
    "non-rapid",
    "eye",
    "movement",
    "sleep",
    "stages",
    "2,",
    "3,",
    "and",
    "4,",
    "types",
    "overlapped,",
    "whereas",
    "there",
    "was",
    "no",
    "overlap",
    "of",
    "types",
    "between",
    "stages",
    "1",
    "and",
    "2.",
    "Types",
    "of",
    "rapid",
    "eye",
    "movement",
    "sleep",
    "did",
    "not",
    "overlap",
    "with",
    "those",
    "from",
    "stages",
    "2,",
    "3,",
    "and",
    "4",
    "but",
    "did",
    "overlap",
    "with",
    "wake",
    "and",
    "stage",
    "1",
    "types.",
    "The",
    "majority",
    "of",
    "observed",
    "types",
    "were",
    "significant",
    "in",
    "all",
    "4",
    "groups",
    "of",
    "subjects.",
    "Conclusions:",
    "Sleep",
    "stages",
    "appear",
    "to",
    "be",
    "less",
    "homogenous",
    "than",
    "rule-based",
    "sleep",
    "scoring",
    "would",
    "suggest.",
    "Types",
    "were",
    "either",
    "restricted",
    "to",
    "one",
    "stage",
    "or",
    "overlapped",
    "with",
    "neighboring",
    "stages."
  ]
]  | 
	[
  "classification"
]  | 
	[
  "sleep wake cycle",
  "electrodiagnosis",
  "electrophysiology",
  "electroencephalography"
]  | 
	[
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ]
]  | 
					
	18980511 
 | 
	[
  "introduction",
  "materials",
  "preparation of supported lipid membranes",
  "measurement of mol% cholesterol",
  "afm imaging of lipid membranes",
  "high-resolution sims analysis",
  "determination of lipid composition within lipid phases",
  "results",
  "cholesterol-free phase-separated supported lipid membranes",
  "n-dlpc/d 70 -dspc domains (see later)",
  "phase-separated supported lipid membranes with 3-15 mol% cholesterol",
  "supported lipid membranes containing 19 mol% cholesterol and greater",
  "significance and implications",
  "conclusion",
  "title",
  "abstract"
]  | 
	[
  [
    "Lateral",
    "variations",
    "in",
    "component",
    "distribution",
    "within",
    "the",
    "plasma",
    "membrane",
    "are",
    "required",
    "to",
    "coordinate",
    "membrane-mediated",
    "cellular",
    "functions",
    "[1]",
    "[2]",
    "[3]",
    ".",
    "The",
    "nonrandom",
    "distributions",
    "of",
    "certain",
    "proteins",
    "within",
    "the",
    "plasma",
    "membrane",
    "are",
    "well-established",
    "[4]",
    "[5]",
    "[6]",
    "[7]",
    "[8]",
    "[9]",
    ".",
    "Lipids",
    "and",
    "cholesterol",
    "are",
    "also",
    "believed",
    "to",
    "be",
    "spatially",
    "organized",
    "in",
    "biological",
    "membranes,",
    "but",
    "whether",
    "their",
    "organization",
    "is",
    "driven",
    "by",
    "lipid-lipid",
    "or",
    "lipid-protein",
    "interactions",
    "is",
    "not",
    "clear",
    "[1]",
    "[2]",
    "[3]",
    ".",
    "In",
    "one",
    "model",
    "of",
    "plasma",
    "membrane",
    "organization,",
    "differential",
    "affinities",
    "between",
    "cholesterol",
    "and",
    "other",
    "membrane",
    "components",
    "are",
    "hypothesized",
    "to",
    "drive",
    "the",
    "formation",
    "of",
    "liquid-ordered,",
    "cholesterol-and",
    "sphingolipid-enriched",
    "nanoscale",
    "domains",
    "(diameters",
    "b300",
    "nm)",
    "that",
    "are",
    "referred",
    "to",
    "as",
    "lipid",
    "rafts",
    "[1,",
    "3,",
    "10,",
    "11]",
    ".",
    "Thus,",
    "characterizing",
    "the",
    "effects",
    "of",
    "cholesteroldependent",
    "interactions",
    "on",
    "component",
    "distribution",
    "within",
    "the",
    "plasma",
    "membrane",
    "is",
    "the",
    "goal",
    "of",
    "much",
    "research..",
    "Insight",
    "into",
    "how",
    "lipid-cholesterol",
    "and",
    "lipid-lipid",
    "interactions",
    "might",
    "influence",
    "lipid",
    "organization",
    "within",
    "biological",
    "membranes",
    "has",
    "been",
    "acquired",
    "by",
    "studying",
    "model",
    "lipid",
    "membranes",
    "[12]",
    ".",
    "In",
    "the",
    "absence",
    "of",
    "cholesterol,",
    "membranes",
    "composed",
    "of",
    "a",
    "low",
    "and",
    "high",
    "melting",
    "temperature",
    "lipid",
    "component",
    "homogeneously",
    "mix",
    "when",
    "heated",
    "above",
    "the",
    "melting",
    "transition",
    "temperature",
    "(T",
    "m",
    ")",
    "of",
    "both",
    "lipid",
    "species,",
    "but",
    "separate",
    "into",
    "disordered",
    "fluid-phase",
    "and",
    "ordered",
    "gel-phase",
    "domains",
    "when",
    "cooled",
    "below",
    "the",
    "T",
    "m",
    "of",
    "the",
    "high-melting",
    "temperature",
    "lipid",
    "species",
    "[13,",
    "14]",
    ".",
    "The",
    "addition",
    "of",
    "cholesterol",
    "to",
    "the",
    "membrane",
    "affects",
    "the",
    "lipid",
    "miscibility",
    "and",
    "domain",
    "microstructure",
    "observed",
    "at",
    "room",
    "temperature",
    "in",
    "a",
    "manner",
    "that",
    "depends",
    "on",
    "the",
    "degree",
    "of",
    "saturation",
    "in",
    "the",
    "low-melting",
    "temperature",
    "lipid",
    "[15]",
    "[16]",
    "[17]",
    "[18]",
    ".",
    "At",
    "low",
    "cholesterol",
    "concentrations,",
    "membranes",
    "composed",
    "of",
    "a",
    "di-unsaturated",
    "low",
    "T",
    "m",
    "lipid,",
    "such",
    "as",
    "1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine",
    "(DOPC),",
    "and",
    "a",
    "high",
    "T",
    "m",
    "lipid",
    "species",
    "exhibit",
    "macroscopic",
    "fluid-and",
    "gel-phase",
    "domains",
    "[14,",
    "15]",
    ".",
    "At",
    "higher",
    "cholesterol",
    "concentrations",
    "(mole",
    "fraction",
    "N~0.16),",
    "the",
    "gel-phase",
    "is",
    "replaced",
    "by",
    "macroscopic",
    "liquidordered",
    "domains",
    "that",
    "coexist",
    "with",
    "the",
    "disordered",
    "fluid-phase",
    "[14,",
    "[17]",
    "[18]",
    "[19]",
    "[20]",
    "[21]",
    ".",
    "Above",
    "a",
    "threshold",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "(mole",
    "fraction",
    "Ñ",
    "0.4),",
    "phase",
    "separation",
    "ceases",
    "and",
    "homogeneous",
    "lipid",
    "mixing",
    "occurs",
    "[14,",
    "[17]",
    "[18]",
    "[19]",
    "[20]",
    "[21]",
    ".",
    "In",
    "contrast,",
    "macroscopic",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "are",
    "usually",
    "not",
    "detected",
    "in",
    "cholesterol-containing",
    "ternary",
    "membranes",
    "in",
    "which",
    "the",
    "lipid",
    "species",
    "with",
    "the",
    "low",
    "T",
    "m",
    "is",
    "saturated,",
    "such",
    "as",
    "1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine",
    "(DLPC)",
    "[14,",
    "15,",
    "17,",
    "18,",
    "[22]",
    "[23]",
    "[24]",
    "[25]",
    ".",
    "The",
    "gel-phase",
    "domains",
    "that",
    "coexist",
    "with",
    "the",
    "disordered",
    "fluid-phase",
    "undergo",
    "a",
    "reduction",
    "in",
    "size",
    "without",
    "the",
    "formation",
    "of",
    "macroscopic,",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "as",
    "the",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "increases",
    "[15,",
    "22,",
    "23]",
    ".",
    "For",
    "example,",
    "Fig.",
    "1",
    "shows",
    "the",
    "ternary",
    "phase",
    "diagram",
    "determined",
    "by",
    "Zhao",
    "et",
    "al.",
    "for",
    "giant",
    "unilamellar",
    "vesicles",
    "composed",
    "of",
    "DLPC/1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine",
    "(DSPC)/cholesterol",
    "at",
    "room",
    "temperature",
    "[22]",
    ".",
    "At",
    "a",
    "threshold",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "(0.15-0.2",
    "mole",
    "fraction),",
    "phase",
    "separation",
    "could",
    "not",
    "be",
    "visualized",
    "in",
    "giant",
    "unilamellar",
    "vesicles",
    "(GUVs)",
    "using",
    "conventional",
    "fluorescence",
    "microscopy,",
    "but",
    "fluorescence",
    "resonance",
    "energy",
    "transfer",
    "(FRET)",
    "measurements",
    "indicate",
    "that",
    "the",
    "membrane",
    "is",
    "not",
    "homogeneously",
    "mixed",
    "[18,",
    "22]",
    ".",
    "This",
    "FRET",
    "behavior",
    "is",
    "postulated",
    "to",
    "be",
    "due",
    "to",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "nanoscopic",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "in",
    "the",
    "membrane,",
    "even",
    "though",
    "tiny",
    "gel-phase",
    "domains",
    "and",
    "distinct",
    "lipid",
    "clusters",
    "transiently",
    "produced",
    "by",
    "non-ideal",
    "mixing",
    "may",
    "also",
    "be",
    "consistent",
    "with",
    "these",
    "results",
    "[18,",
    "20,",
    "22,",
    "25,",
    "26]",
    "..",
    "Although",
    "saturated,",
    "low",
    "T",
    "m",
    "lipids",
    "are",
    "rarely",
    "found",
    "in",
    "cellular",
    "membranes,",
    "identification",
    "of",
    "how",
    "this",
    "change",
    "in",
    "lipid",
    "structure",
    "alters",
    "membrane",
    "phase",
    "behavior",
    "provides",
    "a",
    "better",
    "understanding",
    "of",
    "the",
    "physiological",
    "significance",
    "of",
    "fatty",
    "acid",
    "chain",
    "unsaturation",
    "in",
    "biological",
    "membranes.",
    "Moreover,",
    "demonstration",
    "of",
    "the",
    "existence",
    "of",
    "nanoscopic",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "in",
    "model",
    "lipid",
    "membranes",
    "would",
    "indicate",
    "that",
    "lipid-lipid",
    "and",
    "lipid-cholesterol",
    "interactions",
    "are",
    "sufficient",
    "to",
    "produce",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "with",
    "dimensions",
    "similar",
    "to",
    "those",
    "that",
    "may",
    "exist",
    "in",
    "biological",
    "membranes.",
    "Despite",
    "the",
    "significance",
    "of",
    "such",
    "a",
    "finding,",
    "whether",
    "the",
    "nanoscale",
    "heterogeneity",
    "detected",
    "in",
    "membranes",
    "composed",
    "of",
    "DLPC,",
    "DSPC,",
    "and",
    "a",
    "threshold",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "is",
    "due",
    "to",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "liquid-ordered",
    "domains,",
    "gelphase",
    "domains,",
    "or",
    "non-ideally",
    "mixed",
    "transient",
    "lipid",
    "assemblages",
    "has",
    "not",
    "been",
    "definitively",
    "established..",
    "A",
    "key",
    "difference",
    "between",
    "phase-separated",
    "domains",
    "and",
    "nonideally",
    "mixed",
    "transient",
    "lipid",
    "clusters",
    "is",
    "that",
    "the",
    "composition",
    "and",
    "microstructure",
    "would",
    "be",
    "constant",
    "between",
    "nanoscopic",
    "phaseseparated",
    "domains",
    "of",
    "the",
    "same",
    "phase,",
    "as",
    "opposed",
    "to",
    "varying",
    "from",
    "one",
    "structure",
    "to",
    "another",
    "in",
    "non-ideally",
    "mixed",
    "lipid",
    "assemblages",
    "[18]",
    ".",
    "Liquid-ordered",
    "and",
    "gel-phase",
    "domains",
    "can",
    "be",
    "discriminated",
    "by",
    "their",
    "microstructures,",
    "as",
    "the",
    "edges",
    "of",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "are",
    "smooth",
    "and",
    "rounded,",
    "whereas",
    "the",
    "perimeters",
    "of",
    "gel-phase",
    "domains",
    "are",
    "angular",
    "and",
    "jagged",
    "[18,",
    "22,",
    "23,",
    "27]",
    ".",
    "The",
    "membrane",
    "thickness",
    "may",
    "also",
    "differ",
    "between",
    "gel-phase",
    "and",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "[28]",
    ".",
    "Therefore,",
    "information",
    "on",
    "the",
    "composition",
    "and",
    "microstructure",
    "of",
    "individual",
    "domains",
    "is",
    "required",
    "to",
    "identify",
    "whether",
    "the",
    "lipid",
    "structures",
    "detected",
    "at",
    "the",
    "threshold",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "are",
    "non-ideally",
    "mixed",
    "lipid",
    "assemblages",
    "or",
    "phase-separated",
    "domains",
    "in",
    "the",
    "gel-or",
    "liquid-ordered",
    "phase.",
    "The",
    "microstructure,",
    "and",
    "therefore",
    "phase,",
    "of",
    "submicron-sized",
    "lipid",
    "assemblages",
    "within",
    "supported",
    "lipid",
    "bilayers",
    "can",
    "be",
    "characterized",
    "with",
    "atomic",
    "force",
    "microscopy",
    "(AFM)",
    "even",
    "when",
    "the",
    "domain",
    "sizes",
    "are",
    "below",
    "the",
    "lateral",
    "resolution",
    "of",
    "conventional",
    "fluorescence",
    "microscopy",
    "[15,",
    "16,",
    "23,",
    "25,",
    "29,",
    "30]",
    "..",
    "Assessing",
    "the",
    "lipid",
    "composition",
    "of",
    "individual",
    "lipid",
    "domains",
    "is",
    "more",
    "challenging",
    "because",
    "few",
    "analytical",
    "techniques",
    "yield",
    "spatially",
    "resolved",
    "and",
    "chemically",
    "specific",
    "information.",
    "Secondary",
    "ion",
    "mass",
    "spectrometry",
    "(SIMS)",
    "is",
    "one",
    "of",
    "the",
    "few",
    "approaches",
    "that",
    "enables",
    "imaging",
    "specific",
    "lipid",
    "species",
    "within",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "with",
    "both",
    "chemical",
    "and",
    "spatial",
    "specificity",
    "[30]",
    "[31]",
    "[32]",
    "[33]",
    "[34]",
    "[35]",
    "[36]",
    "[37]",
    "[38]",
    "[39]",
    "[40]",
    ".",
    "Time-of-flight",
    "SIMS",
    "(TOF-SIMS)",
    "is",
    "a",
    "molecular",
    "imaging",
    "approach",
    "that",
    "has",
    "the",
    "advantage",
    "of",
    "not",
    "requiring",
    "labels",
    "for",
    "lipid",
    "identification,",
    "but",
    "the",
    "lateral",
    "resolution",
    "and",
    "sensitivity",
    "is",
    "seldom",
    "sufficient",
    "to",
    "characterize",
    "submicron-sized",
    "lipid",
    "domains",
    "[41]",
    ".",
    "Recently,",
    "a",
    "combination",
    "of",
    "high-resolution",
    "SIMS",
    "performed",
    "with",
    "a",
    "Cameca",
    "NanoSIMS",
    "50",
    "and",
    "lipid-specific",
    "isotope",
    "labeling",
    "has",
    "permitted",
    "the",
    "distributions",
    "of",
    "two",
    "isotopically",
    "labeled",
    "lipid",
    "species",
    "in",
    "phase-separated",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "to",
    "be",
    "imaged",
    "with",
    "100-nm-lateral",
    "resolution",
    "and",
    "quantified",
    "[31]",
    ",",
    "rendering",
    "this",
    "a",
    "promising",
    "approach",
    "to",
    "analyze",
    "the",
    "lipid",
    "composition",
    "within",
    "nanoscopic",
    "lipid",
    "domains",
    "(diameters",
    "b300",
    "nm).",
    "The",
    "Cameca",
    "NanoSIMS",
    "50",
    "is",
    "a",
    "magnetic",
    "sector",
    "mass",
    "spectrometer",
    "that",
    "can",
    "image",
    "differences",
    "in",
    "elemental",
    "and",
    "isotopic",
    "composition",
    "[42]",
    ".",
    "To",
    "identify",
    "and",
    "image",
    "different",
    "lipids",
    "using",
    "a",
    "NanoSIMS,",
    "each",
    "lipid",
    "species",
    "must",
    "contain",
    "a",
    "distinct",
    "stable",
    "isotope",
    "so",
    "that",
    "the",
    "secondary",
    "ions",
    "generated",
    "during",
    "analysis",
    "can",
    "be",
    "linked",
    "to",
    "the",
    "parent",
    "lipid",
    "species",
    "[42]",
    "..",
    "Here",
    "we",
    "use",
    "AFM",
    "and",
    "NanoSIMS",
    "to",
    "characterize",
    "the",
    "effects",
    "of",
    "cholesterol",
    "addition",
    "on",
    "the",
    "microstructure",
    "and",
    "composition",
    "of",
    "lipid",
    "domains",
    "in",
    "ternary",
    "membranes",
    "composed",
    "of",
    "the",
    "saturated,",
    "low",
    "T",
    "m",
    "lipid",
    "15",
    "N-1,2-dilauryl-sn-glycero-3-phosphocholine",
    "(",
    "15",
    "N-DLPC),",
    "and",
    "the",
    "high",
    "T",
    "m",
    "lipid",
    "1,2-distearoyl-D",
    "70",
    "-sn-glycero-3-phosphocholine",
    "(D",
    "70",
    "-DSPC).",
    "We",
    "investigated",
    "the",
    "cholesterol",
    "concentrations",
    "between",
    "0",
    "and",
    "19",
    "mol%.",
    "Over",
    "this",
    "range",
    "of",
    "cholesterol",
    "concentrations,",
    "GUVs",
    "composed",
    "of",
    "DLPC/DSPC",
    "exhibit",
    "macroscopic",
    "phase-separated",
    "domains",
    "and",
    "nanoscale",
    "heterogeneous",
    "mixing",
    "that",
    "is",
    "postulated",
    "to",
    "signify",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "tiny",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "[18,",
    "22]",
    ".",
    "Supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "are",
    "the",
    "subject",
    "of",
    "these",
    "studies",
    "to",
    "permit",
    "analyses",
    "with",
    "NanoSIMS",
    "and",
    "AFM.",
    "Although",
    "discrepancies",
    "in",
    "the",
    "phase",
    "behavior",
    "of",
    "supported",
    "membranes",
    "and",
    "GUVs",
    "have",
    "been",
    "reported",
    "[25]",
    ",",
    "we",
    "avoided",
    "the",
    "non-equilibrium",
    "effects",
    "potentially",
    "induced",
    "by",
    "the",
    "solid",
    "support",
    "by",
    "using",
    "slow-cooled",
    "vesicle",
    "fusion",
    "to",
    "prepare",
    "the",
    "supported",
    "membranes,",
    "as",
    "demonstrated",
    "by",
    "Longo",
    "and",
    "coworkers",
    "[23]",
    ".",
    "Analysis",
    "of",
    "the",
    "same",
    "regions",
    "of",
    "the",
    "membrane",
    "with",
    "both",
    "AFM",
    "and",
    "NanoSIMS",
    "enabled",
    "correlation",
    "of",
    "domain",
    "microstructure",
    "with",
    "lipid",
    "composition,",
    "and",
    "allowed",
    "us",
    "to",
    "assess",
    "whether",
    "the",
    "nanoscopic",
    "lipid",
    "assemblages",
    "that",
    "occur",
    "near",
    "the",
    "threshold",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "are",
    "non-ideally",
    "mixed",
    "clusters,",
    "or",
    "phase-separated",
    "lipid",
    "domains",
    "in",
    "either",
    "a",
    "gel",
    "or",
    "liquid-ordered",
    "state.",
    "As",
    "shown",
    "later,",
    "the",
    "AFM",
    "and",
    "NanoSIMS",
    "data",
    "indicate",
    "that",
    "the",
    "nanoscopic",
    "lipid",
    "assemblies",
    "within",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane",
    "are",
    "gel-phase",
    "domains."
  ],
  [
    "The",
    "chrome-patterned,",
    "oxidized",
    "silicon",
    "substrates",
    "(10-nm-thick",
    "oxide",
    "layer)",
    "were",
    "prepared",
    "as",
    "previously",
    "described",
    "[31]",
    "using",
    "silicon",
    "wafers",
    "that",
    "were",
    "a",
    "generous",
    "gift",
    "from",
    "Prof.",
    "Steven",
    "G.",
    "Boxer",
    "was",
    "synthesized",
    "as",
    "reported",
    "[31]",
    ".",
    "To",
    "minimize",
    "possible",
    "oxidation,",
    "cholesterol",
    "was",
    "freshly",
    "synthesized",
    "from",
    "i-cholesteryl",
    "methyl",
    "ether",
    "(Sigma)",
    "as",
    "reported",
    "[43]",
    ".",
    "The",
    "cholesterol",
    "and",
    "phospholipid",
    "concentrations",
    "in",
    "the",
    "vesicle",
    "solutions",
    "were",
    "measured",
    "with",
    "the",
    "Amplex",
    "®",
    "Red",
    "Cholesterol",
    "Assay",
    "Kit",
    "and",
    "the",
    "Amplex",
    "®",
    "Red",
    "Phospholiase",
    "D",
    "Assay",
    "Kit,",
    "respectively,",
    "from",
    "Molecular",
    "Probes",
    "(Eugene,",
    "OR).",
    "Millipore",
    "(18",
    "mΩ)",
    "water",
    "was",
    "used",
    "in",
    "all",
    "experiments."
  ],
  [
    "Small",
    "unilamellar",
    "vesicles",
    "were",
    "created",
    "from",
    "an",
    "equal",
    "molar",
    "ratio",
    "of",
    "15",
    "A",
    "small",
    "amount",
    "(1",
    "mol%)",
    "of",
    "the",
    "fluorescent",
    "lipid,",
    "NBD-PC,",
    "was",
    "added",
    "to",
    "the",
    "mixture",
    "to",
    "allow",
    "the",
    "evaluation",
    "of",
    "membrane",
    "integrity",
    "and",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "phase",
    "separation",
    "using",
    "fluorescence",
    "microscopy.",
    "These",
    "components",
    "were",
    "dissolved",
    "in",
    "chloroform,",
    "dried",
    "under",
    "nitrogen,",
    "and",
    "placed",
    "under",
    "a",
    "vacuum",
    "to",
    "remove",
    "residual",
    "chloroform.",
    "The",
    "lipid",
    "film",
    "was",
    "resuspended",
    "in",
    "65°C",
    "water",
    "to",
    "a",
    "final",
    "lipid",
    "concentration",
    "of",
    "0.5",
    "mg/mL.",
    "The",
    "lipid",
    "solution",
    "was",
    "heated",
    "in",
    "a",
    "65°C",
    "water",
    "bath",
    "for",
    "15",
    "min,",
    "vortexed,",
    "transferred",
    "to",
    "a",
    "plastic",
    "tube,",
    "and",
    "sonicated",
    "using",
    "a",
    "tip",
    "sonicator",
    "(Branson",
    "Tip",
    "Sonifier",
    "Model",
    "250,",
    "Branson",
    "Ultrasonics,",
    "Danbury",
    "CT)",
    "for",
    "30",
    "s",
    "intervals",
    "until",
    "it",
    "became",
    "transparent.",
    "The",
    "vesicle",
    "solution",
    "was",
    "reheated",
    "to",
    "65°C",
    "in",
    "a",
    "water",
    "bath,",
    "and",
    "2.5",
    "mL",
    "of",
    "65°C",
    "vesicle",
    "solution",
    "was",
    "added",
    "to",
    "a",
    "60-mmdiameter",
    "×",
    "15-mm-tall",
    "polystyrene",
    "culture",
    "dish",
    "containing",
    "multiple",
    "chrome-patterned,",
    "oxidized",
    "silicon",
    "substrates",
    "submerged",
    "in",
    "2.5",
    "mL",
    "of",
    "65°C",
    "water.",
    "The",
    "culture",
    "dish",
    "was",
    "covered,",
    "incubated",
    "at",
    "room",
    "temperature",
    "for",
    "40",
    "min",
    "to",
    "allow",
    "for",
    "bilayer",
    "formation,",
    "and",
    "then",
    "was",
    "transferred",
    "into",
    "a",
    "65°C",
    "water",
    "bath.",
    "The",
    "substrates",
    "were",
    "gently",
    "shaken",
    "under",
    "water",
    "to",
    "dislodge",
    "vesicles",
    "adhered",
    "to",
    "the",
    "bilayer's",
    "surface,",
    "and",
    "were",
    "transferred",
    "to",
    "a",
    "fresh",
    "65°C",
    "water",
    "bath.",
    "The",
    "water",
    "bath",
    "containing",
    "the",
    "substrates",
    "was",
    "placed",
    "in",
    "a",
    "programmable",
    "oven",
    "(ECHOterm™",
    "IN35",
    "Programmable",
    "Chilling/Heating",
    "Incubator,",
    "Torrey",
    "Pines",
    "Scientific,",
    "San",
    "Diego,",
    "CA),",
    "maintained",
    "at",
    "70°C",
    "for",
    "1",
    "h,",
    "and",
    "then",
    "was",
    "slowly",
    "cooled",
    "to",
    "room",
    "temperature",
    "at",
    "a",
    "rate",
    "of",
    "5°C/h",
    "to",
    "induce",
    "phase",
    "separation.",
    "To",
    "prepare",
    "the",
    "lipid",
    "membranes",
    "for",
    "SIMS",
    "analysis,",
    "the",
    "samples",
    "were",
    "flash-frozen",
    "in",
    "liquid",
    "ethane",
    "and",
    "freeze-dried",
    "as",
    "previously",
    "described",
    "[31]",
    "[32]",
    "[33]",
    ".",
    "To",
    "evaluate",
    "sample",
    "quality,",
    "fluorescence",
    "imaging",
    "was",
    "performed",
    "on",
    "a",
    "Leica",
    "DM6000",
    "B",
    "upright",
    "fluorescence",
    "microscope",
    "equipped",
    "with",
    "a",
    "fluorescence",
    "filter",
    "cube",
    "(GFP,",
    "Leica)",
    "that",
    "matches",
    "the",
    "excitation",
    "and",
    "emission",
    "spectra",
    "for",
    "NBD-PC."
  ],
  [
    "The",
    "moles",
    "of",
    "cholesterol",
    "and",
    "phosphatidylcholine",
    "(PC)",
    "in",
    "each",
    "vesicle",
    "solution",
    "were",
    "measured",
    "using",
    "the",
    "Amplex",
    "®",
    "Red",
    "Cholesterol",
    "Assay",
    "Kit",
    "and",
    "the",
    "Amplex",
    "®",
    "Red",
    "Phospholiase",
    "D",
    "Assay",
    "Kit,",
    "respectively.",
    "The",
    "assays",
    "were",
    "performed",
    "in",
    "96-well",
    "plates",
    "purchased",
    "from",
    "Costar",
    "®",
    "(Corning,",
    "NY),",
    "and",
    "the",
    "fluorescence",
    "intensity",
    "was",
    "read",
    "using",
    "a",
    "Synergy",
    "HT",
    "Multi-Mode",
    "Microplate",
    "Reader",
    "Model",
    "SIAFRT",
    "(Biotek",
    "®",
    "Instruments,",
    "Inc.,",
    "Winooski,",
    "VT).",
    "Cholesterol",
    "and",
    "PC",
    "standards",
    "were",
    "used",
    "to",
    "create",
    "the",
    "calibration",
    "curves.",
    "Eight",
    "replicates",
    "were",
    "performed",
    "on",
    "each",
    "vesicle",
    "and",
    "standard",
    "solution.",
    "The",
    "μmole",
    "of",
    "cholesterol",
    "and",
    "PC",
    "measured",
    "in",
    "each",
    "small",
    "unilamellar",
    "vesicle",
    "solution",
    "was",
    "used",
    "to",
    "calculate",
    "the",
    "mol%",
    "of",
    "cholesterol.",
    "The",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "in",
    "the",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "is",
    "assumed",
    "to",
    "be",
    "the",
    "same",
    "as",
    "the",
    "cholesterol",
    "content",
    "in",
    "the",
    "vesicle",
    "solution",
    "used",
    "for",
    "bilayer",
    "formation."
  ],
  [
    "AFM",
    "analysis",
    "was",
    "performed",
    "in",
    "ambient",
    "air",
    "and",
    "temperature",
    "using",
    "an",
    "Asylum",
    "MFP-3D™",
    "Stand",
    "Alone",
    "AFM.",
    "AFM",
    "images",
    "were",
    "acquired",
    "of",
    "the",
    "phase-separated",
    "membranes",
    "within",
    "specific",
    "grid",
    "boxes,",
    "which",
    "were",
    "relocated",
    "and",
    "analyzed",
    "with",
    "the",
    "NanoSIMS.",
    "Measurements",
    "were",
    "taken",
    "with",
    "standard",
    "tapping",
    "300",
    "kHz",
    "AFM",
    "probes",
    "(Tap300Al-G,",
    "Budget",
    "Sensors,",
    "Bulgaria)",
    "in",
    "AC",
    "(tapping)",
    "mode",
    "operated",
    "in",
    "the",
    "repulsive",
    "tip-sample",
    "interaction",
    "regime",
    "to",
    "preserve",
    "tip",
    "lifetime.",
    "Images",
    "were",
    "flattened",
    "to",
    "the",
    "first",
    "order.",
    "The",
    "line",
    "scans",
    "were",
    "averaged",
    "over",
    "three",
    "pixels",
    "perpendicular",
    "to",
    "the",
    "line-section",
    "path",
    "to",
    "minimize",
    "random",
    "variations",
    "in",
    "height",
    "due",
    "to",
    "noise.",
    "The",
    "line",
    "scans",
    "made",
    "on",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane",
    "were",
    "not",
    "averaged",
    "because",
    "the",
    "domains",
    "were",
    "often",
    "smaller",
    "than",
    "the",
    "3-pixel",
    "averaging",
    "width.",
    "For",
    "each",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "investigated,",
    "the",
    "height",
    "difference",
    "between",
    "the",
    "gel-and",
    "fluid-phase",
    "regions",
    "was",
    "measured",
    "at",
    "ten",
    "different",
    "domain",
    "interfaces."
  ],
  [
    "SIMS",
    "was",
    "performed",
    "on",
    "a",
    "Cameca",
    "NanoSIMS",
    "50",
    "instrument",
    "(Cameca,",
    "France)",
    "at",
    "Lawrence",
    "Livermore",
    "National",
    "Laboratory",
    "(Livermore,",
    "CA).",
    "Measurements",
    "were",
    "made",
    "with",
    "a~0.8",
    "pA,",
    "16",
    "keV",
    "Cs",
    "+",
    "primary",
    "ion",
    "beam",
    "focused",
    "onto",
    "a~100",
    "nm-diameter",
    "spot",
    "with",
    "an",
    "analysis",
    "area",
    "of",
    "25",
    "μm",
    "×",
    "25",
    "μm.",
    "A",
    "beam",
    "diameter",
    "of",
    "102",
    "nm",
    "was",
    "determined",
    "using",
    "the",
    "reported",
    "knife-edge",
    "method",
    "[31]",
    ".",
    "Measurements",
    "consisted",
    "of",
    "six",
    "replicate",
    "scans",
    "of",
    "512",
    "×",
    "512",
    "pixels",
    "with",
    "a",
    "dwell",
    "time",
    "of",
    "0.3",
    "ms/pixel,",
    "and",
    "corresponded",
    "to",
    "a",
    "primary",
    "ion",
    "dose",
    "of",
    "3.8",
    "×",
    "10",
    "14",
    "ions/cm",
    "2",
    ".",
    "The",
    "analysis",
    "conditions",
    "used",
    "in",
    "this",
    "work",
    "were",
    "chosen",
    "to",
    "provide",
    "sufficient",
    "ion",
    "counts",
    "to",
    "characterize",
    "the",
    "samples",
    "while",
    "minimizing",
    "analysis",
    "time.",
    "Based",
    "on",
    "our",
    "analysis",
    "conditions,",
    "a",
    "total",
    "sputter",
    "time",
    "of",
    "472",
    "s,",
    "and",
    "the",
    "sputtering",
    "rate",
    "of",
    "2.5",
    "nm",
    "μm",
    "2",
    "/pA",
    "s",
    "determined",
    "on",
    "other",
    "biological",
    "samples",
    "[45]",
    ",",
    "we",
    "estimate",
    "that",
    "the",
    "sputtering",
    "depth",
    "was~1.5",
    "nm",
    "for",
    "these",
    "measurements.",
    "Based",
    "on",
    "the",
    "thickness",
    "of",
    "the",
    "bilayer,",
    "the",
    "analysis",
    "time",
    "could",
    "have",
    "been~3",
    "times",
    "longer,",
    "though",
    "the",
    "secondary",
    "ion",
    "intensities",
    "obtained",
    "in",
    "each",
    "additional",
    "replicate",
    "scan",
    "would",
    "be",
    "lower",
    "than",
    "the",
    "previous",
    "scan.",
    "The",
    "pixel",
    "size",
    "in",
    "the",
    "NanoSIMS",
    "ion",
    "images",
    "was",
    "49",
    "nm×",
    "49",
    "nm,",
    "which",
    "is",
    "smaller",
    "than",
    "the",
    "beam",
    "diameter.",
    "The",
    "secondary",
    "ion",
    "signals",
    ",",
    "and",
    "the",
    "secondary",
    "electron",
    "signal",
    "were",
    "collected",
    "simultaneously",
    "using",
    "multi-collection",
    "mode.",
    "A",
    "mass",
    "resolving",
    "power",
    "of~7500",
    "was",
    "used",
    "to",
    "separate",
    "isobaric",
    "interferences",
    "from",
    "the",
    "isotopes",
    "of",
    "interest,",
    "e.g.,",
    ")",
    "were",
    "smoothed",
    "over",
    "3",
    "×",
    "3",
    "pixels",
    "(147",
    "nm×",
    "147",
    "nm).",
    "Then",
    "the",
    "lipid-specific",
    "ion",
    "signal",
    "was",
    "normalized",
    "by",
    "dividing",
    "the",
    "intensity",
    "for",
    "each",
    "ion",
    "by",
    "the",
    "12",
    "C",
    "−",
    "intensity",
    "measured",
    "at",
    "the",
    "same",
    "pixel",
    "in",
    "order",
    "to",
    "minimize",
    "random,",
    "concentration-independent",
    "changes",
    "in",
    "the",
    "signal",
    "intensity.",
    "Regions",
    "of",
    "interest",
    "(ROIs)",
    "on",
    "the",
    "calibration",
    "set",
    "of",
    "homogeneous",
    "lipid",
    "membranes",
    "were",
    "defined",
    "on",
    "areas",
    "of",
    "the",
    "substrate",
    "that",
    "were",
    "covered",
    "by",
    "the",
    "membrane,",
    "and",
    "excluded",
    "areas",
    "where",
    "the",
    "chrome",
    "grid",
    "or",
    "obvious",
    "defects",
    "were",
    "visible",
    "in",
    "the",
    "secondary",
    "electron",
    "image",
    "that",
    "was",
    "collected",
    "in",
    "parallel",
    "to",
    "the",
    "secondary",
    "ion",
    "images.",
    "ROIs",
    "on",
    "the",
    "phaseseparated",
    "membranes",
    "that",
    "consisted",
    "of",
    "only",
    "gel-phase",
    "or",
    "fluid-phase",
    "regions",
    "were",
    "defined",
    "based",
    "on",
    "the",
    "correlated",
    "AFM",
    "images."
  ],
  [
    "A",
    "calibration",
    "curve",
    "correlating",
    "the",
    "normalized",
    "N-DLPC",
    "in",
    "the",
    "membrane",
    "was",
    "made",
    "as",
    "previously",
    "reported",
    "[31,",
    "32]",
    ".",
    "Briefly,",
    "NanoSIMS",
    "analysis",
    "was",
    "performed",
    "on",
    "homogeneous",
    "lipid",
    "bilayers",
    "that",
    "systematically",
    "varied",
    "in",
    "mol%",
    "15",
    "N-DLPC",
    "to",
    "unlabeled",
    "DLPC.",
    "These",
    "samples",
    "were",
    "used",
    "instead",
    "of",
    "15",
    "N-DLPC/cholesterol",
    "membranes",
    "in",
    "order",
    "to",
    "obtain",
    "a",
    "calibration",
    "curve",
    "that",
    "was",
    "accurate",
    "at",
    "both",
    "high",
    "and",
    "low",
    "15",
    "N-DLPC",
    "concentrations.",
    "The",
    "same",
    "analytical",
    "conditions",
    "were",
    "used",
    "for",
    "the",
    "calibration",
    "and",
    "phaseseparated",
    "samples.",
    "We",
    "assessed",
    "the",
    "validity",
    "of",
    "these",
    "calibration",
    "samples",
    "by",
    "calculating",
    "the",
    "relative",
    "sensitivity",
    "factors",
    "(RSF)",
    "[36]",
    "N-DLPC",
    "in",
    "the",
    "gel-phase",
    "and",
    "standard",
    "deviation",
    "were",
    "calculated.",
    "Because",
    "NBD-PC",
    "is",
    "excluded",
    "from",
    "the",
    "gel-phase",
    "[31,",
    "46]",
    ",",
    "the",
    "average",
    "amount",
    "of",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "in",
    "the",
    "gelphase",
    "regions",
    "of",
    "the",
    "cholesterol-free",
    "membrane",
    "was",
    "determined",
    "by",
    "subtracting",
    "the",
    "mol%",
    "15",
    "N-DLPC",
    "measured",
    "at",
    "membrane",
    "locations",
    "identified",
    "as",
    "gel-phase",
    "by",
    "AFM",
    "from",
    "100",
    "mol%."
  ],
  [
    "The",
    "cooling",
    "rate",
    "employed",
    "for",
    "bilayer",
    "formation",
    "determines",
    "whether",
    "the",
    "phase",
    "separation",
    "approaches",
    "equilibrium.",
    "All",
    "of",
    "the",
    "samples",
    "we",
    "studied",
    "were",
    "cooled",
    "to",
    "room",
    "temperature",
    "at",
    "the",
    "same",
    "rate",
    "to",
    "ensure",
    "that",
    "any",
    "variations",
    "in",
    "domain",
    "morphology",
    "were",
    "not",
    "due",
    "to",
    "differences",
    "in",
    "their",
    "thermal",
    "history.",
    "For",
    "compatibility",
    "with",
    "NanoSIMS",
    "analysis,",
    "the",
    "room",
    "temperature",
    "15",
    "N-DLPC/D",
    "70",
    "-DSPC/",
    "cholesterol",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "were",
    "flash-frozen",
    "and",
    "freeze-dried",
    "to",
    "remove",
    "the",
    "water",
    "without",
    "perturbing",
    "lipid",
    "organization",
    "[31]",
    ".",
    "Previous",
    "studies",
    "demonstrated",
    "that",
    "flash-freezing",
    "and",
    "freeze-drying",
    "do",
    "not",
    "induce",
    "further",
    "phase",
    "separation",
    "or",
    "other",
    "changes",
    "in",
    "membrane",
    "organization",
    "[31]",
    ",",
    "and",
    "the",
    "preserved",
    "membrane",
    "structure",
    "reflects",
    "that",
    "present",
    "at",
    "room",
    "temperature",
    "prior",
    "to",
    "membrane",
    "preservation.",
    "The",
    "lipids",
    "in",
    "the",
    "membrane",
    "do",
    "not",
    "exhibit",
    "lateral",
    "mobility",
    "after",
    "freeze-drying,",
    "and",
    "the",
    "membrane",
    "organization",
    "does",
    "not",
    "change",
    "in",
    "the",
    "time",
    "between",
    "AFM",
    "imaging",
    "and",
    "NanoSIMS",
    "analysis",
    "(2-6",
    "weeks).",
    "Note",
    "that",
    "the",
    "use",
    "of",
    "isotopically",
    "labeled",
    "lipids",
    "is",
    "not",
    "expected",
    "to",
    "alter",
    "membrane",
    "phase",
    "behavior",
    "because",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "has",
    "nearly",
    "the",
    "same",
    "T",
    "m",
    "as",
    "natural",
    "abundance",
    "DSPC",
    "(50.5°C",
    "and",
    "55.0°C,",
    "respectively,",
    "[44]",
    "),",
    "and",
    "the",
    "single",
    "nitrogen-15",
    "isotope",
    "in",
    "15",
    "N-DLPC",
    "should",
    "not",
    "affect",
    "its",
    "T",
    "m",
    "."
  ],
  [
    "To",
    "correlate",
    "domain",
    "structure",
    "with",
    "lipid",
    "composition,",
    "we",
    "imaged",
    "the",
    "same",
    "locations",
    "within",
    "the",
    "phase-separated",
    "supported",
    "lipid",
    "membrane",
    "using",
    "both",
    "AFM",
    "and",
    "NanoSIMS.",
    "Similar",
    "to",
    "previous",
    "AFM",
    "studies",
    "of",
    "phase-separated",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "[29]",
    "[30]",
    "[31]",
    "46",
    ",47],",
    "we",
    "observed",
    "circular",
    "gel-phase",
    "domains",
    "with",
    "a",
    "bimodal",
    "size",
    "distribution",
    "in",
    "the",
    "cholesterol-free",
    "membrane",
    "(Fig.",
    "3",
    "and",
    "supplemental",
    "images).",
    "Small",
    "gel-phase",
    "domains",
    "with",
    "diameters",
    "below",
    "200",
    "nm",
    "were",
    "primarily",
    "located",
    "near",
    "the",
    "perimeters",
    "of",
    "the",
    "large",
    "gelphase",
    "structures",
    "that",
    "were",
    "several",
    "microns",
    "in",
    "diameter",
    "(",
    "Fig.",
    "3a",
    "and",
    "b)",
    ".",
    "Nanoscopic",
    "fluid-phase",
    "subdomains",
    "were",
    "also",
    "trapped",
    "inside",
    "of",
    "the",
    "micron-sized",
    "gel-phase",
    "domains.",
    "We",
    "measured",
    "a",
    "height",
    "difference",
    "of",
    "1.3",
    "nm",
    "at",
    "the",
    "interface",
    "between",
    "the",
    "gel-and",
    "fluid-phase",
    "domains",
    "(Fig.",
    "3b,",
    "inset",
    ").",
    "This",
    "height",
    "difference",
    "is",
    "smaller",
    "than",
    "that",
    "previously",
    "reported",
    "between",
    "gel-and",
    "fluid-phase",
    "domains",
    "(1.8",
    "nm)",
    "and",
    "is",
    "closer",
    "to",
    "the",
    "height",
    "difference",
    "between",
    "an",
    "asymmetric",
    "domain,",
    "with",
    "one",
    "gel-phase",
    "and",
    "one",
    "fluid-phase",
    "leaflet,",
    "and",
    "a",
    "symmetric",
    "fluidphase",
    "domain",
    "[31,",
    "46]",
    ".",
    "However,",
    "NanoSIMS",
    "analysis",
    "of",
    "these",
    "domains",
    "(",
    "Fig.",
    "3c",
    "and",
    "d)",
    "indicated",
    "they",
    "contain",
    "too",
    "little",
    "15",
    "N-DLPC",
    "to",
    "be",
    "asymmetric",
    "15"
  ],
  [
    ".",
    "The",
    "smaller",
    "height",
    "difference",
    "we",
    "measured",
    "between",
    "the",
    "gel-and",
    "fluid-phases",
    "is",
    "likely",
    "due",
    "to",
    "our",
    "use",
    "of",
    "a",
    "repulsive",
    "tip-sample",
    "interaction",
    "for",
    "AFM",
    "imaging",
    "[48]",
    ".",
    "AFM",
    "imaging",
    "of",
    "similar",
    "samples",
    "performed",
    "with",
    "a",
    "repulsive",
    "tip-sample",
    "interaction",
    "yielded",
    "a",
    "height",
    "difference",
    "of",
    "1.3",
    "nm",
    "at",
    "the",
    "gel/fluid",
    "interface,",
    "but",
    "with",
    "a",
    "tip-sample",
    "interaction",
    "that",
    "fluctuated",
    "between",
    "repulsive",
    "and",
    "attractive,",
    "we",
    "measured",
    "a",
    "height",
    "difference",
    "of",
    "1.6",
    "nm",
    "at",
    "the",
    "same",
    "location",
    "(not",
    "shown),",
    "which",
    "is",
    "close",
    "to",
    "the",
    "1.8",
    "nm",
    "height",
    "difference",
    "that",
    "was",
    "previously",
    "reported",
    "[31,",
    "46]",
    ".",
    "NanoSIMS",
    "analysis",
    "was",
    "performed",
    "at",
    "the",
    "same",
    "membrane",
    "locations",
    "that",
    "were",
    "imaged",
    "with",
    "AFM.",
    "The",
    "normalized",
    "12",
    "N-DLPC,",
    "respectively.",
    "The",
    "absence",
    "of",
    "lipid-specific",
    "ions",
    "at",
    "the",
    "some",
    "pixels",
    "is",
    "due",
    "to",
    "the",
    "low",
    "intensity",
    "of",
    "the",
    "minor",
    "isotopes,",
    "as",
    "the",
    "AFM",
    "image",
    "of",
    "the",
    "freeze-dried",
    "membrane",
    "does",
    "not",
    "show",
    "damage",
    "at",
    "these",
    "sites",
    "(",
    "Fig.",
    "3a",
    "and",
    "b)",
    ".",
    "Similar",
    "to",
    "previous",
    "reports,",
    "the",
    "area",
    "occupied",
    "by",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "within",
    "the",
    "membrane",
    "appeared",
    "to",
    "be",
    "slightly",
    "lower",
    "than",
    "that",
    "expected",
    "based",
    "on",
    "the",
    "mol%",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "in",
    "the",
    "vesicles",
    "used",
    "for",
    "membrane",
    "preparation",
    "[31]",
    ".",
    "This",
    "difference",
    "in",
    "the",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "content",
    "within",
    "the",
    "supported",
    "membranes",
    "and",
    "the",
    "vesicles",
    "used",
    "for",
    "membrane",
    "formation",
    "is",
    "likely",
    "due",
    "to",
    "the",
    "selective",
    "adsorption",
    "of",
    "these",
    "different",
    "lipid",
    "species",
    "onto",
    "the",
    "substrate,",
    "or",
    "from",
    "a",
    "lipid",
    "exchange",
    "process",
    "[23,",
    "49]",
    "..",
    "Using",
    "the",
    "NanoSIMS",
    "calibration",
    "curves",
    "described",
    "earlier,",
    "we",
    "determined",
    "that",
    "the",
    "15",
    "N-DLPC",
    "concentration",
    "was~97",
    "mol%",
    "in",
    "the",
    "fluid-phase",
    "domains,",
    "and~6",
    "mol%",
    "in",
    "the",
    "gel-phase",
    "domains.",
    "Because",
    "NBD-PC",
    "is",
    "excluded",
    "from",
    "the",
    "gel-phase",
    "[31,",
    "46]",
    ",",
    "the",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "concentration",
    "in",
    "the",
    "gel-phase",
    "regions",
    "of",
    "the",
    "cholesterol-free",
    "membrane",
    "is~94",
    "mol%.",
    "These",
    "results",
    "are",
    "consistent",
    "with",
    "previous",
    "NanoSIMS",
    "studies",
    "of",
    "DLPC/DSPC",
    "membranes,",
    "and",
    "with",
    "phase",
    "diagram",
    "predictions",
    "that",
    "the",
    "gel-phase",
    "contains",
    "≤10",
    "mol%",
    "DLPC",
    "and",
    "the",
    "fluidphase",
    "contains",
    "≤10",
    "mol%",
    "DSPC",
    "[31,",
    "50]",
    ".",
    "The",
    "one",
    "exception",
    "was",
    "at",
    "the",
    "edges",
    "of",
    "the",
    "large",
    "gel-phase",
    "domains,",
    "where",
    "the",
    "data",
    "occasionally",
    "suggest",
    "the",
    "fractions",
    "of",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "and",
    "15",
    "N-DLPC",
    "within",
    "the",
    "same",
    "pixel",
    "(yellow",
    "areas,",
    "Fig.",
    "3c",
    "and",
    "d)",
    "were",
    "more",
    "nearly",
    "equal.",
    "This",
    "might",
    "suggest",
    "that",
    "the",
    "amount",
    "of",
    "lipid",
    "mixing",
    "at",
    "the",
    "edges",
    "of",
    "the",
    "domains",
    "was",
    "greater",
    "than",
    "that",
    "predicted",
    "by",
    "phase-diagrams.",
    "However,",
    "the",
    "AFM",
    "images",
    "acquired",
    "at",
    "these",
    "sites",
    "show",
    "that",
    "the",
    "edges",
    "of",
    "the",
    "gelphase",
    "domains",
    "are",
    "not",
    "smooth,",
    "but",
    "instead",
    "consist",
    "of",
    "many",
    "small",
    "crevices",
    "and",
    "peninsulas.",
    "Thus,",
    "the",
    "detection",
    "of",
    "elevated",
    "amounts",
    "of",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "and",
    "15",
    "N-DLPC",
    "at",
    "the",
    "same",
    "pixel",
    "occurred",
    "because",
    "these",
    "structures",
    "were",
    "not",
    "resolved",
    "in",
    "these",
    "NanoSIMS",
    "images,",
    "which",
    "were",
    "acquired",
    "with",
    "a",
    "beam",
    "diameter",
    "of~100",
    "nm",
    "and",
    "were",
    "smoothed",
    "to",
    "the",
    "equivalent",
    "of~150-nm-lateral",
    "resolution."
  ],
  [
    "The",
    "addition",
    "of",
    "cholesterol",
    "to",
    "the",
    "membrane",
    "induced",
    "an",
    "elongation",
    "of",
    "the",
    "macroscopic",
    "gel-phase",
    "domains.",
    "At",
    "3",
    "mol%",
    "cholesterol,",
    "the",
    "macroscopic",
    "D",
    "70",
    "-DSPC-enriched",
    "gel-phase",
    "domains",
    "were",
    "oblong",
    "and",
    "had",
    "jagged",
    "borders",
    "(",
    "Fig.",
    "4a",
    "and",
    "d,",
    "and",
    "supplemental",
    "images)",
    ".",
    "A",
    "network",
    "of",
    "gel-phase",
    "domains",
    "was",
    "observed",
    "at",
    "7",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "(",
    "Fig.",
    "4b",
    "and",
    "e,",
    "and",
    "supplemental",
    "images)",
    ".",
    "Similar",
    "to",
    "the",
    "cholesterol-free",
    "membrane,",
    "fluid-phase",
    "subdomains",
    "were",
    "entrapped",
    "within",
    "the",
    "macroscopic",
    "gel-phase",
    "structures,",
    "and",
    "gel-phase",
    "microdomains",
    "were",
    "dispersed",
    "throughout",
    "the",
    "fluid-phase",
    "in",
    "the",
    "3",
    "and",
    "7",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membranes.",
    "A",
    "networked",
    "gel-phase",
    "structure",
    "that",
    "contained",
    "entrapped",
    "fluid-phase",
    "subdomains",
    "was",
    "also",
    "observed",
    "in",
    "the",
    "15",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane,",
    "but",
    "the",
    "edges",
    "of",
    "the",
    "gel-phase",
    "structures",
    "were",
    "smoother",
    "than",
    "those",
    "observed",
    "in",
    "the",
    "other",
    "membranes",
    "(",
    "Fig.",
    "4c",
    "and",
    "f,",
    "and",
    "supplemental",
    "images)",
    ".",
    "The",
    "area",
    "occupied",
    "by",
    "the",
    "D",
    "70",
    "-DSPC-rich",
    "domains",
    "in",
    "the",
    "membranes",
    "that",
    "contained",
    "7",
    "and",
    "15",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "was",
    "higher",
    "than",
    "that",
    "expected",
    "based",
    "on",
    "the",
    "compositions",
    "of",
    "the",
    "vesicles",
    "used",
    "for",
    "membrane",
    "formation.",
    "This",
    "difference",
    "in",
    "surface",
    "coverage",
    "was",
    "consistent",
    "across",
    "the",
    "membrane",
    "(see",
    "supplemental",
    "images).",
    "We",
    "attribute",
    "these",
    "results",
    "to",
    "the",
    "phenomena",
    "occurring",
    "during",
    "bilayer",
    "formation,",
    "such",
    "as",
    "the",
    "selective",
    "adsorption",
    "of",
    "the",
    "lipid",
    "species",
    "onto",
    "the",
    "substrate",
    "or",
    "lipid",
    "exchange,",
    "as",
    "opposed",
    "to",
    "selective",
    "incorporation",
    "of",
    "cholesterol",
    "into",
    "the",
    "ordered",
    "domains,",
    "because",
    "cholesterol",
    "is",
    "expected",
    "to",
    "evenly",
    "distribute",
    "between",
    "the",
    "two",
    "lipid",
    "phases",
    "[14]",
    ".",
    "Moreover,",
    "the",
    "increase",
    "in",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "domain",
    "surface",
    "coverage",
    "seems",
    "larger",
    "than",
    "the",
    "fraction",
    "of",
    "cholesterol",
    "in",
    "the",
    "membrane.",
    "The",
    "height",
    "difference",
    "between",
    "the",
    "gel-and",
    "fluid-phase",
    "regions",
    "of",
    "the",
    "3,",
    "7,",
    "and",
    "15",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membranes",
    "did",
    "not",
    "change",
    "from",
    "that",
    "measured",
    "in",
    "the",
    "cholesterol-free",
    "membrane",
    "(~1.3",
    "nm)",
    ".",
    "Similarly,",
    "the",
    "15",
    "N-DLPC",
    "concentration",
    "within",
    "the",
    "D",
    "70",
    "-DSPC-enriched",
    "domains",
    "remained",
    "constant",
    "at~6",
    "mol%,",
    "indicating",
    "that",
    "the",
    "solubility",
    "of",
    "15",
    "N-DLPC",
    "within",
    "the",
    "D",
    "70",
    "-DSPC-rich",
    "domains",
    "did",
    "not",
    "change",
    "over",
    "this",
    "range",
    "of",
    "cholesterol",
    "concentrations.",
    "We",
    "did",
    "not",
    "attempt",
    "to",
    "quantify",
    "the",
    "mol%",
    "of",
    "15",
    "N-DLPC",
    "in",
    "the",
    "fluid-phase",
    "due",
    "to",
    "the",
    "high",
    "likelihood",
    "that",
    "the",
    "numerous",
    "nanoscopic",
    "gel-phase",
    "domains",
    "detected",
    "within",
    "the",
    "fluid-phase",
    "by",
    "AFM",
    "would",
    "inadvertently",
    "be",
    "included",
    "in",
    "the",
    "measurement."
  ],
  [
    "Our",
    "AFM",
    "and",
    "NanoSIMS",
    "images",
    "of",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane",
    "clearly",
    "show",
    "heterogeneity",
    "in",
    "membrane",
    "composition",
    "N-DLPC,",
    "respectively,",
    "were",
    "acquired",
    "at",
    "the",
    "same",
    "site",
    "as",
    "the",
    "AFM",
    "image",
    "(a).",
    "The",
    "absence",
    "of",
    "lipid-specific",
    "ions",
    "at",
    "the",
    "regions",
    "that",
    "appear",
    "dark",
    "is",
    "due",
    "to",
    "the",
    "low",
    "intensity",
    "of",
    "the",
    "minor",
    "isotopes.",
    "(d)",
    "Detail",
    "of",
    "the",
    "region",
    "outlined",
    "in",
    "(a),",
    "which",
    "corresponds",
    "to",
    "the",
    "AFM",
    "image",
    "in",
    "(b).",
    "The",
    "NanoSIMS",
    "images",
    "were",
    "acquired",
    "with~100-nm-lateral",
    "resolution",
    "and",
    "smoothed",
    "over",
    "a",
    "lateral",
    "resolution",
    "of~150",
    "nm..",
    "and",
    "structure",
    "(Fig.",
    "5)",
    ".",
    "Individual",
    "and",
    "micron-sized",
    "aggregates",
    "of",
    "nanoscopic",
    "ordered",
    "domains",
    "enriched",
    "with",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "are",
    "visible",
    "in",
    "the",
    "membrane.",
    "The",
    "height",
    "difference",
    "measured",
    "with",
    "AFM",
    "between",
    "the",
    "gel-and",
    "fluid-phases",
    "in",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane",
    "did",
    "not",
    "vary",
    "with",
    "domain",
    "size",
    "(~1.2",
    "nm),",
    "and",
    "was",
    "similar",
    "to",
    "those",
    "measured",
    "in",
    "membranes",
    "with",
    "lower",
    "cholesterol",
    "levels",
    "(~1.3",
    "nm).",
    "The",
    "15",
    "N-DLPC",
    "concentration",
    "within",
    "the",
    "submicron-size",
    "domains",
    "that",
    "were",
    "resolved",
    "in",
    "the",
    "NanoSIMS",
    "images",
    "was~7",
    "mol%,",
    "within",
    "one",
    "standard",
    "deviation",
    "of",
    "the",
    "value",
    "measured",
    "on",
    "the",
    "0-15",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membranes.",
    "Thus,",
    "a",
    "significant",
    "increase",
    "in",
    "lipid",
    "intermixing",
    "did",
    "not",
    "occur",
    "in",
    "these",
    "domains.",
    "However,",
    "elevated",
    "amounts",
    "of",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "and",
    "15",
    "N-DLPC",
    "were",
    "detected",
    "at",
    "the",
    "same",
    "pixel",
    "more",
    "frequently",
    "in",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane",
    "than",
    "in",
    "the",
    "other",
    "membranes",
    "(yellow",
    "areas,",
    "Fig.",
    "5d-f",
    ").",
    "Comparison",
    "to",
    "the",
    "AFM",
    "images",
    "acquired",
    "at",
    "these",
    "locations",
    "revealed",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "nanoscopic",
    "lipid",
    "structures",
    "that",
    "were",
    "smaller",
    "than",
    "the",
    "resolution",
    "of",
    "the",
    "NanoSIMS",
    "images",
    "(Fig.",
    "5a-c)",
    ".",
    "Therefore,",
    "the",
    "detection",
    "of",
    "significant",
    "amounts",
    "of",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "and",
    "15",
    "N-DLPC",
    "at",
    "the",
    "same",
    "pixel",
    "in",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane",
    "signifies",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "a",
    "phase-separated",
    "domain",
    "that",
    "is",
    "smaller",
    "than",
    "the",
    "lateral",
    "resolution",
    "of",
    "the",
    "NanoSIMS",
    "image.",
    "The",
    "lack",
    "of",
    "an",
    "observable",
    "change",
    "in",
    "the",
    "height",
    "of",
    "the",
    "nanoscopic",
    "lipid",
    "structures",
    "or",
    "lipid",
    "intermixing",
    "denotes",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "phase-separated",
    "domains,",
    "and",
    "not",
    "non-ideally",
    "mixed",
    "lipid",
    "clusters,",
    "in",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane.",
    "Because",
    "AFM",
    "imaging",
    "also",
    "shows",
    "that",
    "both",
    "the",
    "micron-sized",
    "and",
    "nanoscopic",
    "lipid",
    "domains",
    "have",
    "irregular",
    "borders,",
    "we",
    "conclude",
    "that",
    "the",
    "domains",
    "enriched",
    "with",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "remained",
    "in",
    "the",
    "gel-phase",
    "at",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol.",
    "We",
    "also",
    "attempted",
    "to",
    "characterize",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "that",
    "contained",
    "N19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "(27",
    "and",
    "35",
    "mol%",
    "cholesterol).",
    "These",
    "membranes",
    "exhibited",
    "numerous",
    "small",
    "height",
    "changes",
    "(b1",
    "nm)",
    "and",
    "taller",
    "features",
    "indicative",
    "of",
    "debris",
    "by",
    "AFM,",
    "whereas",
    "patches",
    "of",
    "15",
    "N-DLPC",
    "and",
    "very",
    "little",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "was",
    "detected",
    "on",
    "the",
    "substrate",
    "using",
    "the",
    "NanoSIMS",
    "(not",
    "shown).",
    "These",
    "features",
    "are",
    "not",
    "characteristic",
    "of",
    "those",
    "we",
    "have",
    "observed",
    "in",
    "poorly",
    "preserved",
    "membranes,",
    "nor",
    "do",
    "they",
    "resemble",
    "the",
    "dehydration-induced",
    "defects",
    "characterized",
    "by",
    "others",
    "[51]",
    ".",
    "These",
    "results",
    "suggest",
    "that",
    "high-quality",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "did",
    "not",
    "form",
    "under",
    "the",
    "same",
    "conditions",
    "as",
    "those",
    "used",
    "to",
    "create",
    "the",
    "membranes",
    "with",
    "lower",
    "mol%",
    "cholesterol.",
    "found",
    "that",
    "the",
    "addition",
    "of",
    "up",
    "to",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "induced",
    "significant",
    "changes",
    "in",
    "domain",
    "morphology,",
    "but",
    "produced",
    "no",
    "observable",
    "change",
    "in",
    "the",
    "miscibility",
    "of",
    "15",
    "N-DLPC",
    "within",
    "the",
    "gel-phase.",
    "Unlike",
    "previous",
    "results",
    "in",
    "which",
    "the",
    "phase",
    "behavior",
    "of",
    "analogous",
    "supported",
    "membranes",
    "differed",
    "from",
    "that",
    "of",
    "GUVs",
    "[25]",
    ",",
    "our",
    "results",
    "are",
    "in",
    "agreement",
    "with",
    "those",
    "reported",
    "for",
    "DLPC/DSPC/cholesterol",
    "GUVs",
    "and",
    "mica-supported",
    "membranes",
    "[22,",
    "47]",
    ".",
    "This",
    "good",
    "agreement",
    "indicates",
    "that",
    "the",
    "slow-cooled",
    "vesicle",
    "fusion",
    "process",
    "we",
    "employed",
    "for",
    "membrane",
    "formation",
    "likely",
    "allowed",
    "the",
    "membrane",
    "to",
    "approach",
    "equilibrium,",
    "and",
    "neither",
    "the",
    "silicon",
    "substrate",
    "nor",
    "the",
    "isotope",
    "labels",
    "appeared",
    "to",
    "alter",
    "membrane",
    "phase",
    "behavior..",
    "According",
    "to",
    "the",
    "DLPC/DSPC/cholesterol",
    "phase",
    "diagram",
    "(Fig.",
    "1)",
    ",",
    "the",
    "miscibility",
    "point",
    "for",
    "a",
    "1:1",
    "molar",
    "ratio",
    "of",
    "DLPC/DSPC",
    "is~19",
    "mol%",
    "cholesterol,",
    "and",
    "non-ideal",
    "mixing",
    "postulated",
    "to",
    "be",
    "caused",
    "by",
    "nanoscopic",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "has",
    "been",
    "previously",
    "detected",
    "with",
    "FRET",
    "at",
    "slightly",
    "higher",
    "cholesterol",
    "concentrations",
    "(between",
    "20",
    "and",
    "25",
    "mol%)",
    "[18,",
    "22]",
    ".",
    "Yet",
    "gel-phase",
    "domains",
    "were",
    "present",
    "in",
    "our",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "composed",
    "of",
    "DLPC/DSPC",
    "(1:1",
    "molar",
    "ratio)",
    "and",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol.",
    "A",
    "higher",
    "amount",
    "of",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "than",
    "15",
    "N-DLPC",
    "in",
    "the",
    "membrane,",
    "which",
    "could",
    "have",
    "occurred",
    "due",
    "to",
    "small",
    "gravimetric",
    "and",
    "volumetric",
    "errors",
    "in",
    "measuring",
    "the",
    "lipids,",
    "would",
    "shift",
    "the",
    "miscibility",
    "point",
    "to",
    "a",
    "higher",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "(~20",
    "mol%)",
    "than",
    "we",
    "studied",
    "[22]",
    ".",
    "However,",
    "we",
    "expect",
    "that",
    "nanoscopic",
    "gel-phase",
    "domains",
    "would",
    "also",
    "be",
    "present",
    "in",
    "our",
    "membranes",
    "at",
    "20-21",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "because",
    "we",
    "detected",
    "a",
    "small",
    "number",
    "of",
    "micron-sized,",
    "gelphase",
    "domains",
    "at",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "(",
    "Fig.",
    "5a",
    "and",
    "b,",
    "lower",
    "left)",
    ",",
    "and",
    "the",
    "gel-phase",
    "domains",
    "in",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "undergo",
    "a",
    "reduction",
    "in",
    "size",
    "due",
    "to",
    "domain",
    "pinning",
    "before",
    "complete",
    "miscibility",
    "is",
    "reached",
    "[15,",
    "47]",
    ".",
    "This",
    "expectation",
    "is",
    "supported",
    "by",
    "a",
    "recent",
    "report",
    "by",
    "Gosku",
    "and",
    "Longo",
    "[47]",
    ".",
    "The",
    "speckling",
    "in",
    "Gosku",
    "and",
    "Longo's",
    "fluorescence",
    "microscopy",
    "images",
    "of",
    "mica-supported",
    "DLPC/DSPC/",
    "cholesterol",
    "(40/40/20",
    "mol:mol:mol)",
    "membranes",
    "[47]",
    "suggests",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "tiny",
    "phase-separated",
    "domains",
    "that",
    "could",
    "be",
    "detected",
    "by",
    "AFM,",
    "but",
    "were",
    "too",
    "small",
    "to",
    "be",
    "clearly",
    "visualized",
    "with",
    "fluorescence",
    "microscopy.",
    "We",
    "hypothesize",
    "that",
    "the",
    "small",
    "inconsistency",
    "in",
    "the",
    "location",
    "of",
    "the",
    "boundary",
    "for",
    "phase",
    "separation",
    "between",
    "our",
    "results",
    "and",
    "the",
    "published",
    "DLPC/DSPC/cholesterol",
    "phase",
    "diagram",
    "is",
    "due",
    "to",
    "the",
    "difference",
    "in",
    "techniques",
    "used",
    "to",
    "detect",
    "phase",
    "separation,",
    "as",
    "the",
    "AFM",
    "and",
    "NanoSIMS",
    "techniques",
    "we",
    "used",
    "are",
    "better",
    "suited",
    "to",
    "unambiguously",
    "detect",
    "submicron-sized",
    "domains",
    "than",
    "the",
    "conventional",
    "fluorescence",
    "microscopy",
    "[17,",
    "22,",
    "25,",
    "47]",
    ".",
    "The",
    "fusion",
    "of",
    "DLPC/DSPC",
    "(1:1",
    "mol",
    "ratio)",
    "vesicles",
    "that",
    "contained",
    "27",
    "and",
    "35",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "to",
    "the",
    "silicon",
    "substrates",
    "under",
    "conditions",
    "identical",
    "to",
    "those",
    "employed",
    "for",
    "the",
    "other",
    "cholesterol",
    "concentrations",
    "did",
    "not",
    "produce",
    "continuous,",
    "defect-free",
    "membranes.",
    "Increasing",
    "the",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "within",
    "vesicles",
    "composed",
    "of",
    "phase-separating",
    "lipids",
    "is",
    "reported",
    "to",
    "hinder",
    "vesicle",
    "rupture,",
    "causing",
    "an",
    "increase",
    "in",
    "the",
    "critical",
    "number",
    "of",
    "vesicles",
    "that",
    "must",
    "adsorb",
    "to",
    "the",
    "silicon",
    "substrate",
    "in",
    "order",
    "to",
    "initiate",
    "vesicle",
    "fusion",
    "[52]",
    ".",
    "Because",
    "others",
    "have",
    "used",
    "vesicle",
    "fusion",
    "to",
    "form",
    "DLPC/DSPC",
    "(1/1",
    "mole",
    "ratio)",
    "membranes",
    "that",
    "contained",
    "30",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "on",
    "mica",
    "substrates",
    "[47]",
    ",",
    "we",
    "hypothesize",
    "that",
    "the",
    "vesicle",
    "concentration",
    "or",
    "incubation",
    "time",
    "we",
    "employed",
    "for",
    "vesicle",
    "fusion",
    "was",
    "insufficient",
    "for",
    "the",
    "formation",
    "of",
    "defect-free",
    "membranes",
    "that",
    "contained",
    "27",
    "or",
    "35",
    "mol%",
    "cholesterol."
  ],
  [
    "Our",
    "data",
    "indicate",
    "that",
    "interactions",
    "between",
    "saturated",
    "lipids,",
    "such",
    "as",
    "DLPC",
    "and",
    "DSPC,",
    "and",
    "cholesterol",
    "are",
    "insufficient",
    "to",
    "drive",
    "the",
    "formation",
    "of",
    "liquid-ordered",
    "domains",
    "that",
    "are",
    "similar",
    "to",
    "those",
    "expected",
    "to",
    "exist",
    "within",
    "biological",
    "membranes.",
    "Our",
    "results,",
    "and",
    "those",
    "reported",
    "by",
    "others,",
    "suggest",
    "that",
    "molecular",
    "interactions",
    "between",
    "the",
    "fluid-phase",
    "lipid",
    "and",
    "cholesterol",
    "affect",
    "the",
    "structure",
    "of",
    "the",
    "ordered",
    "lipid",
    "domains",
    "that",
    "form",
    "in",
    "the",
    "membranes",
    "[15,",
    "23]",
    ".",
    "Although",
    "the",
    "DLPC/DSPC/cholesterol",
    "membranes",
    "we",
    "studied",
    "are",
    "not",
    "compositionally",
    "or",
    "biophysically",
    "representative",
    "of",
    "biological",
    "membranes,",
    "our",
    "findings",
    "do",
    "provide",
    "insight",
    "into",
    "the",
    "physiological",
    "significance",
    "of",
    "fatty",
    "acid",
    "chain",
    "saturation",
    "in",
    "biological",
    "membranes.",
    "Specifically,",
    "our",
    "results",
    "support",
    "the",
    "hypothesis",
    "that",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "unsaturation",
    "in",
    "the",
    "fatty",
    "acid",
    "chains",
    "of",
    "the",
    "low-melting",
    "lipids",
    "found",
    "in",
    "biological",
    "membranes",
    "is",
    "required",
    "for",
    "the",
    "formation",
    "of",
    "a",
    "liquid-ordered",
    "phase.",
    "Furthermore,",
    "we",
    "propose",
    "that",
    "the",
    "absence",
    "of",
    "saturated,",
    "low",
    "T",
    "m",
    "lipids",
    "in",
    "cellular",
    "membranes",
    "is",
    "functionally",
    "significant,",
    "as",
    "their",
    "presence",
    "may",
    "hinder",
    "the",
    "formation",
    "of",
    "liquid-ordered",
    "membrane",
    "domains..",
    "This",
    "work",
    "also",
    "establishes",
    "a",
    "direct",
    "approach",
    "to",
    "acquire",
    "correlated",
    "information",
    "on",
    "the",
    "microstructure",
    "and",
    "composition",
    "of",
    "individual",
    "lipid",
    "domains.",
    "This",
    "approach",
    "could",
    "be",
    "extended",
    "to",
    "quantifying",
    "the",
    "amounts",
    "of",
    "DSPC",
    "and",
    "cholesterol",
    "in",
    "the",
    "lipid",
    "domains",
    "detected",
    "in",
    "these",
    "membranes",
    "by",
    "also",
    "incorporating",
    "a",
    "different",
    "distinct",
    "stable",
    "isotope",
    "into",
    "the",
    "cholesterol,",
    "and",
    "creating",
    "separate",
    "calibration",
    "curves",
    "for",
    "DSPC",
    "and",
    "cholesterol",
    "using",
    "sets",
    "of",
    "standard",
    "lipid",
    "membrane",
    "samples.",
    "Such",
    "studies",
    "would",
    "permit",
    "identifying",
    "whether",
    "the",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "is",
    "equal",
    "in",
    "both",
    "lipid",
    "phases,",
    "as",
    "indicated",
    "by",
    "original",
    "experiments",
    "[14]",
    ",",
    "or",
    "if",
    "the",
    "cholesterol",
    "concentration",
    "is",
    "higher",
    "in",
    "the",
    "ordered",
    "domains,",
    "as",
    "found",
    "for",
    "other",
    "lipid",
    "mixtures",
    "[18]",
    ".",
    "Our",
    "approach",
    "could",
    "also",
    "be",
    "used",
    "to",
    "construct",
    "more",
    "detailed",
    "phasediagrams",
    "that",
    "include",
    "tie",
    "lines",
    "for",
    "DLPC/DSPC/cholesterol",
    "or",
    "other",
    "more",
    "physiologically",
    "relevant",
    "lipid",
    "mixtures.",
    "Such",
    "studies",
    "may",
    "clarify",
    "uncertainties",
    "in",
    "membrane",
    "phase",
    "behavior,",
    "and",
    "provide",
    "a",
    "better",
    "understanding",
    "of",
    "how",
    "cholesterol-dependent",
    "interactions",
    "contribute",
    "to",
    "cell",
    "membrane",
    "organization."
  ],
  [
    "By",
    "analyzing",
    "the",
    "same",
    "locations",
    "in",
    "supported",
    "lipid",
    "membranes",
    "with",
    "AFM",
    "and",
    "high-resolution",
    "SIMS,",
    "we",
    "were",
    "able",
    "to",
    "acquire",
    "correlated",
    "information",
    "on",
    "the",
    "microstructure",
    "and",
    "composition",
    "of",
    "the",
    "individual",
    "lipid",
    "domains",
    "found",
    "in",
    "the",
    "membranes",
    "at",
    "room",
    "temperature.",
    "We",
    "showed",
    "that",
    "the",
    "nanoscopic",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "domains",
    "present",
    "in",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane",
    "were",
    "in",
    "the",
    "gel-phase.",
    "The",
    "15",
    "N-DLPC",
    "concentration",
    "in",
    "the",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "domains",
    "was",
    "relatively",
    "constant",
    "(6-7",
    "mol%)",
    "for",
    "cholesterol",
    "concentrations",
    "between",
    "0",
    "and",
    "19",
    "mol%,",
    "indicating",
    "that",
    "cholesterol",
    "did",
    "not",
    "induce",
    "a",
    "significant",
    "increase",
    "in",
    "lipid",
    "intermixing",
    "in",
    "these",
    "domains.",
    "Our",
    "results",
    "support",
    "the",
    "finding",
    "of",
    "Zhao",
    "et",
    "al.",
    "[22]",
    "that",
    "nanoscopic",
    "phase-separated",
    "domains",
    "are",
    "present",
    "in",
    "the",
    "membrane",
    "at~19",
    "mol%",
    "cholesterol,",
    "but",
    "we",
    "found",
    "no",
    "evidence",
    "for",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "liquid-ordered",
    "domains.",
    "We",
    "conclude",
    "that",
    "the",
    "interactions",
    "between",
    "cholesterol",
    "and",
    "saturated",
    "lipids,",
    "such",
    "as",
    "DLPC",
    "and",
    "DSPC,",
    "are",
    "not",
    "sufficient",
    "to",
    "create",
    "liquid-ordered",
    "domains.",
    "Consequently,",
    "the",
    "absence",
    "of",
    "saturated,",
    "low-melting",
    "lipids",
    "in",
    "biological",
    "membranes",
    "may",
    "be",
    "required",
    "for",
    "the",
    "formation",
    "of",
    "the",
    "liquidordered",
    "domains",
    "that",
    "are",
    "expected",
    "to",
    "exist",
    "in",
    "cellular",
    "membranes."
  ],
  [
    "Correlated",
    "AFM",
    "and",
    "NanoSIMS",
    "imaging",
    "to",
    "probe",
    "cholesterol-induced",
    "changes",
    "in",
    "phase",
    "behavior",
    "and",
    "non-ideal",
    "mixing",
    "in",
    "ternary",
    "lipid",
    "membranes."
  ],
  [
    "Cholesterol",
    "is",
    "believed",
    "to",
    "be",
    "an",
    "important",
    "component",
    "in",
    "compositionally",
    "distinct",
    "lipid",
    "domains",
    "in",
    "the",
    "cellular",
    "plasma",
    "membrane,",
    "which",
    "are",
    "referred",
    "to",
    "as",
    "lipid",
    "rafts.",
    "Insight",
    "into",
    "how",
    "cholesterol",
    "influences",
    "the",
    "interactions",
    "that",
    "contribute",
    "to",
    "plasma",
    "membrane",
    "organization",
    "can",
    "be",
    "acquired",
    "from",
    "model",
    "lipid",
    "membranes.",
    "Here",
    "we",
    "characterize",
    "the",
    "lipid",
    "mixing",
    "and",
    "phase",
    "behavior",
    "exhibited",
    "by",
    "15",
    "N-dilaurolyphosphatidycholine",
    "(",
    "15",
    "N-DLPC)/",
    "deuterated",
    "distearoylphosphatiylcholine",
    "(D",
    "70",
    "-DSPC)",
    "membranes",
    "with",
    "various",
    "amounts",
    "of",
    "cholesterol",
    "(0,",
    "3,",
    "7,",
    "15",
    "or",
    "19",
    "mol%)",
    "at",
    "room",
    "temperature.",
    "The",
    "microstructures",
    "and",
    "compositions",
    "of",
    "individual",
    "membrane",
    "domains",
    "were",
    "determined",
    "by",
    "imaging",
    "the",
    "same",
    "membrane",
    "locations",
    "with",
    "both",
    "atomic",
    "force",
    "microscopy",
    "(AFM)",
    "and",
    "high-resolution",
    "secondary",
    "ion",
    "mass",
    "spectrometry",
    "(SIMS)",
    "performed",
    "with",
    "a",
    "Cameca",
    "NanoSIMS",
    "50.",
    "As",
    "the",
    "cholesterol",
    "composition",
    "increased",
    "from",
    "0",
    "to",
    "19",
    "mol%,",
    "the",
    "circular",
    "ordered",
    "domains",
    "became",
    "more",
    "elongated,",
    "and",
    "the",
    "amount",
    "of",
    "15",
    "N-DLPC",
    "in",
    "the",
    "gel-phase",
    "domains",
    "remained",
    "constant",
    "at",
    "6-7",
    "mol%.",
    "Individual",
    "and",
    "micronsized",
    "clusters",
    "of",
    "nanoscopic",
    "domains",
    "enriched",
    "in",
    "D",
    "70",
    "-DSPC",
    "were",
    "abundant",
    "in",
    "the",
    "19",
    "mol%",
    "cholesterol",
    "membrane.",
    "AFM",
    "imaging",
    "showed",
    "that",
    "these",
    "lipid",
    "domains",
    "had",
    "irregular",
    "borders,",
    "indicating",
    "that",
    "they",
    "were",
    "gel-phase",
    "domains,",
    "and",
    "not",
    "non-ideally",
    "mixed",
    "lipid",
    "clusters",
    "or",
    "nanoscopic",
    "liquid-ordered",
    "domains."
  ]
]  | 
	[
  "phase separation",
  "room temperature",
  "atomic force microscopy",
  "secondary ion mass spectrometry",
  "microstructures"
]  | 
	[
  "high resolution",
  "lipid raft"
]  | 
	[
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "B",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ]
]  | 
					
	18982235 
 | 
	[
  "",
  "title",
  "abstract"
]  | 
	[
  [
    "The",
    "temperature",
    "equation",
    "diagnostic",
    "terms",
    "in",
    "°C/second",
    "along",
    "the",
    "glider",
    "track",
    "from",
    "ESPreSSO",
    "ROMS",
    "model.",
    "(A)",
    "Temperature",
    "rate",
    "of",
    "change,",
    "(B)",
    "Vertical",
    "diffusion",
    "term,",
    "(C)",
    "Total",
    "advection.",
    "The",
    "total",
    "advection",
    "is",
    "separated",
    "into",
    "along--shelf",
    "advection",
    "(D,",
    "u*dT/dx);",
    "cross--shelf",
    "advection",
    "(E,",
    "v*dT/dy);",
    "and",
    "vertical",
    "advection",
    "(F,",
    "w*dT/dz).",
    "The",
    "black",
    "contour",
    "in",
    "all",
    "plots",
    "indicates",
    "the",
    "bottom",
    "of",
    "the",
    "surface",
    "mixed",
    "layer",
    "and",
    "magenta",
    "contour",
    "indicates",
    "the",
    "bottom",
    "of",
    "the",
    "thermocline.",
    "Landfall",
    "time",
    "was",
    "on",
    "August",
    "28",
    "th",
    "2011",
    "at",
    "9:35",
    "GMT.",
    "Supplementary",
    "Fig.",
    "7",
    "Same",
    "as",
    "Fig.",
    "4",
    "but",
    "for",
    "maximum",
    "sustained",
    "10m",
    "wind",
    "speeds",
    "(m/s).",
    "Supplementary",
    "Fig.",
    "8",
    "Central",
    "pressure",
    "sensitivity",
    "table.",
    "Sensitivity",
    "(hPa)",
    "is",
    "calculated",
    "by",
    "taking",
    "the",
    "cumulative",
    "hourly",
    "sum",
    "of",
    "the",
    "differences",
    "from",
    "00",
    "to",
    "13",
    "UTC",
    "on",
    "28",
    "August.",
    "Options",
    "column",
    "is",
    "described",
    "in",
    "Supplementary",
    "Fig.",
    "10",
    "Time--series",
    "plots",
    "of",
    "air",
    "temperature",
    "(red),",
    "water",
    "temperature",
    "(blue),",
    "pressure",
    "(black),",
    "and",
    "wind",
    "speed",
    "(green).",
    "The",
    "first",
    "vertical",
    "black",
    "line",
    "indicates",
    "the",
    "maximum",
    "water",
    "temperature",
    "before",
    "wind",
    "speed",
    "increased",
    "above",
    "5",
    "m",
    "s",
    "--1",
    ",",
    "the",
    "second",
    "represents",
    "the",
    "minimum",
    "temperature",
    "ahead--of",
    "or",
    "at",
    "the",
    "minimum",
    "pressure,",
    "and",
    "the",
    "third",
    "vertical",
    "black",
    "line",
    "is",
    "the",
    "minimum",
    "temperature",
    "before",
    "wind",
    "speeds",
    "drop",
    "below",
    "5",
    "m",
    "s",
    "--1",
    ".",
    "Values",
    "from",
    "these",
    "plots",
    "are",
    "used",
    "to",
    "determine",
    "ahead--of--eye--center",
    "(AOEC)",
    "and",
    "in--storm",
    "cooling",
    "from",
    "NDBC",
    "buoys",
    "used",
    "to",
    "create",
    "Table",
    "1",
    "for",
    "Hurricanes",
    "Arthur",
    "(2014),",
    "Irene,",
    "Barry,",
    "and",
    "Hermine.",
    "Supplementary",
    "Fig.",
    "11",
    "Time--series",
    "plots",
    "of",
    "air",
    "temperature",
    "(red),",
    "water",
    "temperature",
    "(blue),",
    "pressure",
    "(black),",
    "and",
    "wind",
    "speed",
    "(green).",
    "The",
    "first",
    "vertical",
    "black",
    "line",
    "indicates",
    "the",
    "maximum",
    "water",
    "temperature",
    "before",
    "wind",
    "speed",
    "increased",
    "above",
    "5",
    "m",
    "s",
    "--1",
    ",",
    "the",
    "second",
    "represents",
    "the",
    "minimum",
    "temperature",
    "ahead--of",
    "or",
    "at",
    "the",
    "minimum",
    "pressure,",
    "and",
    "the",
    "third",
    "vertical",
    "black",
    "line",
    "is",
    "the",
    "minimum",
    "temperature",
    "before",
    "wind",
    "speeds",
    "drop",
    "below",
    "5",
    "m",
    "s",
    "--1",
    ".",
    "Values",
    "from",
    "these",
    "plots",
    "are",
    "used",
    "to",
    "determine",
    "ahead--of--eye--center",
    "(AOEC)",
    "and",
    "in--storm",
    "cooling",
    "from",
    "NDBC",
    "buoys",
    "used",
    "to",
    "create",
    "Table",
    "1",
    "for",
    "Hurricanes",
    "Allison,",
    "Bonnie,",
    "Danny,",
    "and",
    "Arthur",
    "(1996).",
    "Supplementary",
    "Fig.",
    "12",
    "Time--series",
    "plots",
    "of",
    "air",
    "temperature",
    "(red),",
    "water",
    "temperature",
    "(blue),",
    "pressure",
    "(black),",
    "and",
    "wind",
    "speed",
    "(green).",
    "The",
    "first",
    "vertical",
    "black",
    "line",
    "indicates",
    "the",
    "maximum",
    "water",
    "temperature",
    "before",
    "wind",
    "speed",
    "increased",
    "above",
    "5",
    "m",
    "s",
    "--1",
    ",",
    "the",
    "second",
    "represents",
    "the",
    "minimum",
    "temperature",
    "ahead--of",
    "or",
    "at",
    "the",
    "minimum",
    "pressure,",
    "and",
    "the",
    "third",
    "vertical",
    "black",
    "line",
    "is",
    "the",
    "minimum",
    "temperature",
    "before",
    "wind",
    "speeds",
    "drop",
    "below",
    "5",
    "m",
    "s",
    "--1",
    ".",
    "Values",
    "from",
    "these",
    "plots",
    "are",
    "used",
    "to",
    "determine",
    "ahead--of--eye--center",
    "(AOEC)",
    "and",
    "in--storm",
    "cooling",
    "from",
    "NDBC",
    "buoys",
    "used",
    "to",
    "create",
    "Table",
    "1",
    "for",
    "Hurricanes",
    "Emily,",
    "Bob,",
    "and",
    "Charley."
  ],
  [
    "Stratified",
    "coastal",
    "ocean",
    "interactions",
    "with",
    "tropical",
    "cyclones"
  ],
  [
    "Accurate",
    "forecasts",
    "of",
    "hurricane",
    "intensity",
    "remain",
    "problematic.",
    "Here,",
    "using",
    "an",
    "ocean",
    "observing",
    "network",
    "to",
    "inform",
    "ocean",
    "and",
    "atmospheric",
    "model",
    "simulations,",
    "the",
    "authors",
    "show",
    "that",
    "consideration",
    "of",
    "ahead-of-eye",
    "cooling",
    "improves",
    "intensity",
    "forecasts."
  ]
]  | 
	[]  | 
	[
  "oceanography",
  "atmospheric science",
  "earth sciences"
]  | 
	[
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ]
]  | 
					
	18983838 
 | 
	[
  "introduction",
  "charged thin shell wormholes",
  "stability",
  "case",
  "conclusion",
  "title",
  "abstract"
]  | 
	[
  [
    "Lorentzian",
    "wormholes",
    "were",
    "originally",
    "found",
    "as",
    "solutions",
    "of",
    "the",
    "Einstein",
    "field",
    "equations",
    "with",
    "nontrivial",
    "topology.",
    "In",
    "their",
    "more",
    "simple",
    "examples",
    "they",
    "present",
    "two",
    "mouths",
    "in",
    "asymptotically",
    "flat",
    "spacetimes",
    "connected",
    "by",
    "a",
    "throat",
    "[1]",
    ".",
    "More",
    "general",
    "and",
    "purely",
    "geometric",
    "definitions",
    "allow",
    "to",
    "remove",
    "the",
    "requirement",
    "for",
    "asymptotically",
    "flat",
    "regions",
    "and",
    "the",
    "introduction",
    "of",
    "trivial",
    "topologies",
    "in",
    "wormhole",
    "spacetimes,",
    "both",
    "static",
    "[2]",
    "and",
    "dynamic",
    "[3]",
    ".",
    "All",
    "these",
    "wormholes,",
    "nonetheless,",
    "must",
    "be",
    "threaded",
    "by",
    "matter",
    "that",
    "violates",
    "the",
    "null",
    "energy",
    "condition",
    "if",
    "they",
    "are",
    "going",
    "to",
    "be",
    "traversable",
    "by",
    "material",
    "systems",
    "[1,",
    "2,",
    "3]",
    "..",
    "The",
    "requirements",
    "for",
    "exotic",
    "matter",
    "that",
    "violates",
    "the",
    "energy",
    "conditions",
    "can",
    "be",
    "reduced",
    "introducing",
    "scalar",
    "fields",
    "or",
    "electric",
    "charges.",
    "Very",
    "recently",
    "Kim",
    "and",
    "Lee",
    "[4]",
    "have",
    "presented",
    "exact",
    "solutions",
    "for",
    "a",
    "static",
    "charged",
    "wormhole.",
    "These",
    "spacetimes",
    "are",
    "free",
    "of",
    "horizons,",
    "so",
    "the",
    "charge,",
    "although",
    "having",
    "effects",
    "on",
    "the",
    "stability,",
    "does",
    "not",
    "seriously",
    "affect",
    "the",
    "spacetime",
    "itself..",
    "Despite",
    "nothing",
    "is",
    "known",
    "about",
    "the",
    "equation",
    "of",
    "state",
    "of",
    "exotic",
    "matter,",
    "a",
    "stability",
    "analysis",
    "is",
    "possible",
    "through",
    "linearized",
    "perturbations",
    "around",
    "static",
    "solutions",
    "of",
    "the",
    "Einstein",
    "field",
    "equations.",
    "This",
    "imposes",
    "contraints",
    "onto",
    "the",
    "state",
    "equation",
    "and",
    "the",
    "stability",
    "domain",
    "of",
    "the",
    "solutions.",
    "This",
    "approach",
    "has",
    "been",
    "implemented",
    "by",
    "Poisson",
    "and",
    "Visser",
    "for",
    "spherically",
    "symmetric",
    "thin-shell",
    "wormholes",
    "[5,",
    "6]",
    ".",
    "For",
    "surgical",
    "techniques",
    "to",
    "construct",
    "thin-shell",
    "wormholes,",
    "the",
    "reader",
    "is",
    "referred",
    "to",
    "the",
    "papers",
    "by",
    "Visser",
    "[7,",
    "8]",
    "..",
    "In",
    "this",
    "paper",
    "we",
    "extend",
    "the",
    "stability",
    "analysis",
    "to",
    "the",
    "case",
    "of",
    "charged",
    "wormholes",
    "with",
    "the",
    "aim",
    "to",
    "establish",
    "whether",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "charge",
    "effectively",
    "can",
    "increase",
    "the",
    "stability",
    "domain",
    "of",
    "this",
    "type",
    "of",
    "spacetimes."
  ],
  [
    "We",
    "use",
    "geometrized",
    "units",
    "(c=G=1).",
    "The",
    "Reissner-Nordström",
    "metric",
    "is",
    "the",
    "unique",
    "spherically",
    "symmetric",
    "solution",
    "of",
    "the",
    "vacuum",
    "Einstein-Maxwell",
    "coupled",
    "equations.",
    "In",
    "Schwarzschild",
    "coordinates",
    "X",
    "α",
    "=",
    "(t,",
    "r,",
    "θ,",
    "ϕ)",
    "it",
    "takes",
    "the",
    "form.",
    "where",
    "M",
    "is",
    "the",
    "mass",
    "and",
    "Q",
    "is",
    "the",
    "sum",
    "of",
    "electric",
    "and",
    "magnetic",
    "charges,",
    "measured",
    "by",
    "distant",
    "observers.",
    "If",
    "|Q|",
    "≤",
    "M",
    ",",
    "it",
    "represents",
    "a",
    "black",
    "hole",
    "with",
    "an",
    "event",
    "horizon",
    "with",
    "radius.",
    "If",
    "|Q|",
    ">",
    "M",
    "it",
    "is",
    "a",
    "naked",
    "singularity..",
    "From",
    "the",
    "Reissner-Nordström",
    "geometry",
    "we",
    "can",
    "take",
    "two",
    "copies",
    "of",
    "the",
    "region",
    "with",
    "r",
    "≥",
    "a:.",
    "where",
    "a",
    ">",
    "r",
    "h",
    "if",
    "|Q|",
    "≤",
    "M",
    "and",
    "a",
    ">",
    "0",
    "if",
    "|Q|",
    ">",
    "M,",
    "and",
    "glue",
    "them",
    "together",
    "at",
    "the",
    "hypersurface.",
    "to",
    "make",
    "a",
    "charged",
    "spherically",
    "symmetric",
    "thin",
    "shell",
    "wormhole",
    "M",
    "=",
    "M",
    "+",
    "∪",
    "M",
    "−",
    ".",
    "This",
    "construction",
    "creates",
    "a",
    "geodesically",
    "complete",
    "manifold",
    "M",
    "with",
    "two",
    "asymptotically",
    "plane",
    "regions",
    "connected",
    "by",
    "a",
    "throat.",
    "To",
    "study",
    "this",
    "traversable",
    "wormhole",
    "we",
    "use",
    "the",
    "standard",
    "Darmois-Israel",
    "formalism",
    "[9]",
    ".",
    "For",
    "a",
    "modern",
    "treatment",
    "of",
    "this",
    "formalism",
    "see",
    "for",
    "example",
    "[10]",
    "..",
    "The",
    "wormhole",
    "throat",
    "is",
    "placed",
    "at",
    "Σ.",
    "This",
    "shell",
    "is",
    "a",
    "synchronous",
    "timelike",
    "hypersurface.",
    "We",
    "can",
    "adopt",
    "coordinates",
    "ξ",
    "i",
    "=",
    "(τ,",
    "θ,",
    "ϕ)",
    "in",
    "Σ,",
    "with",
    "τ",
    "the",
    "proper",
    "time",
    "on",
    "the",
    "shell.",
    "In",
    "order",
    "to",
    "analyze",
    "the",
    "stability",
    "under",
    "spherically",
    "symmetric",
    "perturbations,",
    "we",
    "let",
    "the",
    "radius",
    "of",
    "the",
    "throat",
    "be",
    "a",
    "function",
    "of",
    "the",
    "proper",
    "time,",
    "a",
    "=",
    "a(τ",
    ").",
    "Then.",
    "The",
    "second",
    "fundamental",
    "forms",
    "associated",
    "with",
    "the",
    "two",
    "sides",
    "of",
    "the",
    "shell",
    "are:.",
    "where",
    "n",
    "±",
    "γ",
    "are",
    "the",
    "unit",
    "normals",
    "(n",
    "γ",
    "n",
    "γ",
    "=",
    "−1",
    ")",
    "to",
    "Σ",
    "in",
    "M:.",
    "In",
    "the",
    "orthonormal",
    "basis",
    "{eτ",
    ",",
    "eθ,",
    "eφ}",
    "(eτ",
    "=",
    "e",
    "τ",
    ",",
    "eθ",
    "=",
    "r",
    "−1",
    "e",
    "θ",
    ",",
    "eφ",
    "=",
    "(r",
    "sin",
    "θ)",
    "−1",
    "e",
    "ϕ",
    ",",
    "gî",
    "=",
    "ηî)",
    "we",
    "have",
    "that.",
    "and.",
    "where",
    "the",
    "dot",
    "means",
    "d/dτ",
    "..",
    "The",
    "Einstein",
    "equations",
    "on",
    "the",
    "shell",
    "reduce",
    "to",
    "the",
    "Lanczos",
    "equations:.",
    "where.",
    "is",
    "the",
    "surface",
    "stressenergy",
    "tensor,",
    "with",
    "σ",
    "the",
    "surface",
    "energy",
    "density",
    "and",
    "ϑ",
    "1,2",
    "the",
    "surface",
    "tensions.",
    "Then",
    "replacing",
    "Eqs.",
    "(8)",
    "and",
    "(9)",
    "in",
    "Eq.",
    "(10)",
    "we",
    "obtain.",
    "where",
    "p",
    "=",
    "−ϑ",
    "1",
    "=",
    "−ϑ",
    "2",
    "is",
    "the",
    "surface",
    "pressure.",
    "The",
    "surface",
    "energy",
    "density",
    "is",
    "negative,",
    "indicating",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "exotic",
    "matter",
    "in",
    "the",
    "throat..",
    "The",
    "dynamical",
    "evolution",
    "of",
    "the",
    "wormhole",
    "throat",
    "is",
    "governed",
    "by",
    "the",
    "Einstein",
    "equations",
    "plus",
    "the",
    "equation",
    "of",
    "state",
    "p",
    "=",
    "p(σ)",
    "that",
    "relates",
    "p",
    "and",
    "σ.",
    "From",
    "the",
    "Eqs.",
    "(11)",
    "and",
    "(12)",
    "above,",
    "it",
    "is",
    "easy",
    "to",
    "verify",
    "the",
    "energy",
    "conservation",
    "equation:.",
    "where",
    "A",
    "=",
    "4πa",
    "2",
    "is",
    "the",
    "area",
    "of",
    "the",
    "wormhole",
    "throat.",
    "The",
    "first",
    "term",
    "of",
    "Eq.",
    "(13)",
    "represents",
    "the",
    "internal",
    "energy",
    "change",
    "of",
    "the",
    "throat",
    "and",
    "the",
    "second",
    "the",
    "work",
    "done",
    "by",
    "the",
    "internal",
    "forces",
    "of",
    "the",
    "throat..",
    "As",
    "in",
    "the",
    "case",
    "of",
    "uncharged",
    "wormholes",
    "[6]",
    ",",
    "the",
    "conservation",
    "equation",
    "can",
    "be",
    "written",
    "in",
    "the",
    "forṁ.",
    "which",
    "can",
    "be",
    "integrated",
    "to",
    "give.",
    "This",
    "can",
    "be",
    "formally",
    "inverted",
    "to",
    "obtain",
    "σ",
    "=",
    "σ(a).",
    "Thus,",
    "replacing",
    "σ(a)",
    "in",
    "Eq.",
    "(11)",
    "and",
    "regrouping",
    "terms,",
    "the",
    "dynamics",
    "of",
    "the",
    "wormhole",
    "throat",
    "is",
    "completely",
    "determined",
    "by",
    "a",
    "single",
    "equation:"
  ],
  [
    "Eq.",
    "(16)",
    "can",
    "be",
    "rewritten",
    "in",
    "the",
    "form:ȧ.",
    "with.",
    "Let",
    "us",
    "consider",
    "now",
    "a",
    "static",
    "solution",
    "with",
    "radius",
    "a",
    "0",
    "and",
    "the",
    "corresponding",
    "values",
    "of",
    "energy",
    "density",
    "σ",
    "0",
    "and",
    "pressure",
    "p",
    "0",
    ":.",
    "A",
    "Taylor",
    "expansion",
    "to",
    "second",
    "order",
    "of",
    "the",
    "potential",
    "V",
    "(a)",
    "around",
    "the",
    "static",
    "solution",
    "yields:",
    ".",
    "Since",
    "σ",
    "′",
    "=σ/ȧ,",
    "using",
    "the",
    "Eq.",
    "(14),",
    "we",
    "have",
    "that.",
    "The",
    "second",
    "derivative",
    "of",
    "the",
    "potential",
    "is.",
    "Since",
    "σ",
    "′",
    "+",
    "2p",
    "′",
    "=",
    "σ",
    "′",
    "(1",
    "+",
    "2p",
    "′",
    "/σ",
    "′",
    "),",
    "defining",
    "the",
    "parameter",
    "β",
    "2",
    "(σ)",
    "≡",
    "dp/dσ",
    "=",
    "p",
    "′",
    "/σ",
    "′",
    ",",
    "we",
    "have",
    "that.",
    "Replacing",
    "in",
    "a",
    "=",
    "a",
    "0",
    ",",
    "we",
    "have",
    "that",
    "V",
    "(a",
    "0",
    ")",
    "=",
    "V",
    "′",
    "(a",
    "0",
    ")",
    "=",
    "0,",
    "so.",
    "with.",
    "where.",
    "The",
    "wormhole",
    "is",
    "stable",
    "if",
    "and",
    "only",
    "if",
    "V",
    "′′",
    "(a",
    "0",
    ")",
    ">",
    "0.",
    "The",
    "curves",
    "where",
    "V",
    "′′",
    "(a",
    "0",
    ")",
    "=",
    "0",
    "correspond",
    "to.",
    "and.",
    "For",
    "the",
    "analysis",
    "of",
    "the",
    "stability",
    "regions",
    "it",
    "is",
    "convenient",
    "to",
    "consider",
    "five",
    "cases",
    "accordingly",
    "to",
    "the",
    "value",
    "of",
    "charge:.",
    "There",
    "are",
    "two",
    "regions",
    "of",
    "stability,"
  ],
  [
    "|Q|",
    "M",
    "=",
    "1.",
    "There",
    "are",
    "two",
    "regions",
    "of",
    "stability,.",
    ".",
    "There",
    "are",
    "two",
    "regions",
    "of",
    "stability,",
    "i).",
    ".",
    "There",
    "are",
    "two",
    "regions",
    "of",
    "stability,.",
    ".",
    "There",
    "is",
    "one",
    "region",
    "of",
    "stability,.",
    "The",
    "regions",
    "of",
    "stability",
    "for",
    "different",
    "values",
    "of",
    "charge",
    "are",
    "shown",
    "in",
    "Figs.",
    "1",
    "and",
    "2",
    ".",
    "For",
    "ordinary",
    "matter,",
    "β",
    "0",
    "represents",
    "the",
    "velocity",
    "of",
    "sound,",
    "so",
    "it",
    "should",
    "satisfy",
    "0",
    "<",
    "β",
    "2",
    "0",
    "≤",
    "1.",
    "If",
    "the",
    "matter",
    "is",
    "exotic,",
    "as",
    "it",
    "happens",
    "to",
    "be",
    "in",
    "the",
    "throat,",
    "β",
    "0",
    "is",
    "not",
    "necesarily",
    "the",
    "velocity",
    "of",
    "sound",
    "and",
    "it",
    "is",
    "not",
    "clear",
    "which",
    "values",
    "it",
    "can",
    "take",
    "(see",
    "discussion",
    "in",
    "[6]",
    ")."
  ],
  [
    "We",
    "have",
    "applied",
    "a",
    "linearization",
    "stability",
    "analysis",
    "to",
    "thin-shell",
    "wormholes",
    "endowed",
    "with",
    "charge",
    "and",
    "we",
    "have",
    "found",
    "that",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "large",
    "charges",
    "(|Q|/M",
    "≈",
    "1),",
    "significantly",
    "increases",
    "the",
    "possibility",
    "of",
    "obtaining",
    "stable",
    "wormhole",
    "spacetimes,",
    "imposing",
    "less",
    "severe",
    "restrictions",
    "on",
    "the",
    "equation",
    "of",
    "state",
    "of",
    "the",
    "exotic",
    "matter",
    "that",
    "must",
    "be",
    "present",
    "in",
    "the",
    "wormhole",
    "throat."
  ],
  [
    "Linearized",
    "stability",
    "of",
    "charged",
    "thin-shell",
    "wormholes"
  ],
  [
    "The",
    "linearized",
    "stability",
    "of",
    "charged",
    "thin",
    "shell",
    "wormholes",
    "under",
    "spherically",
    "symmetric",
    "perturbations",
    "is",
    "analized.",
    "It",
    "is",
    "shown",
    "that",
    "the",
    "presence",
    "of",
    "a",
    "large",
    "value",
    "of",
    "charge",
    "provides",
    "stabilization",
    "to",
    "the",
    "system,",
    "in",
    "the",
    "sense",
    "that",
    "the",
    "constraints",
    "onto",
    "the",
    "equation",
    "of",
    "state",
    "are",
    "less",
    "severe",
    "than",
    "for",
    "non-charged",
    "wormholes.PACS",
    "number(s):",
    "04"
  ]
]  | 
	[
  "exotic matter",
  "equation of state",
  "lorentzian wormholes"
]  | 
	[
  "einstein-maxwell spacetimes",
  "linear stability"
]  | 
	[
  [
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ],
  [
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "B",
    "I",
    "I",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O",
    "O"
  ]
]  | 
					
	18985550 
 | ["background","identifying existing guidelines search strategy","selection criteria","quality apprai(...TRUNCATED) 
							 | [["Populations","in","crisis","settings","such","as","those","resulting","from","natural","disasters(...TRUNCATED) 
							 | 
	[
  "health care",
  "disasters"
]  | ["occupational safety","epidemiology","environmental health","systematic review","injury prevention"(...TRUNCATED) 
							 | [["O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","B","O","O","O","O","O","O","O","O","O","B","O","O","O","O(...TRUNCATED) 
							 | 
					
	2870460 
 | ["introduction","wind dynamics","ejecta dynamics and line emission","continuum emission","detected?"(...TRUNCATED) 
							 | [["Studies","of","nearby","clusters","have","revealed","a","population","of","intergalactic","stars.(...TRUNCATED) 
							 | 
	[
  "galaxy clusters",
  "interstellar medium"
]  | 
	[]  | [["O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O(...TRUNCATED) 
							 | 
					
	2870734 
 | ["introduction","the generation of a q set or 'item sampling'","3","the participant group","statisti(...TRUNCATED) 
							 | [["This","paper","has","a","marked","practical","aspect.","We","wish","to","encourage","and","facili(...TRUNCATED) 
							 | ["qualitative research","william stephenson","eigenvalues","q methodology","factor rotation","factor(...TRUNCATED) 
							 | 
	[
  "factor inter- pretation"
]  | [["O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","B","I","O","O","O","O","B","I","O(...TRUNCATED) 
							 | 
					
	2870808 
 | ["introduction","remark 2.3","remark 2.4","a priori estimates","estimate on","estimate on ||u","proo(...TRUNCATED) 
							 | [["The","scope","of","this","work","is","the","discretization","by","the","cell-centered","finite","(...TRUNCATED) 
							 | ["noncoercive elliptic equation","weak solution","numerical experiment","convection-diffusion equati(...TRUNCATED) 
							 | 
	[
  "weak regularity assumption",
  "space dimension"
]  | [["O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","B","I","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O(...TRUNCATED) 
							 | 
					
	2871302 
 | ["","participants and task","fmri acquisition and analysis","variance components analysis","fmri act(...TRUNCATED) 
							 | [["MULTISITE","STUDIES","may","remediate","some","of","the","limitations","in","current","functional(...TRUNCATED) 
							 | ["fmri","variance components analysis","region of interest","multisite studies","motor task","total (...TRUNCATED) 
							 | 
	[
  "reproducibility of re- sults"
]  | [["B","I","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","B","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O(...TRUNCATED) 
							 | 
					
	2873973 
 | 
	[
  "background",
  "case presentation",
  "conclusion",
  "consent",
  "title",
  "abstract"
]  | [["Peritoneal","lymphomatosis","is","an","extremely","rare","presentation","of","lymphoma.","It","re(...TRUNCATED) 
							 | ["tuberculous peritonitis","tumor lysis syndrome","continuous renal replacement therapy","bone marro(...TRUNCATED) 
							 | 
	[]  | [["O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","O","B","I","O","O","O","O","O","O","O","O(...TRUNCATED) 
							 | 
					
End of preview. Expand
						in Data Studio
					
	YAML Metadata
		Warning:
	empty or missing yaml metadata in repo card
	(https://huggingface.co/docs/hub/datasets-cards)
A dataset for benchmarking keyphrase extraction and generation techniques from long document English scientific papers. For more details about the dataset please refer the original paper - .
Dataset Summary
Dataset Structure
Data Fields
- id: unique identifier of the document.
 - sections: list of all the sections present in the document.
 - sec_text: list of white space separated list of words present in each section.
 - sec_bio_tags: list of BIO tags of white space separated list of words present in each section.
 - extractive_keyphrases: List of all the present keyphrases.
 - abstractive_keyphrase: List of all the absent keyphrases.
 
Data Splits
| Split | #datapoints | 
|---|---|
| Train-Small | 20,000 | 
| Train-Medium | 50,000 | 
| Train-Large | 1,296,613 | 
| Test | 10,000 | 
| Validation | 10,000 | 
Usage
Small Dataset
from datasets import load_dataset
# get small dataset
dataset = load_dataset("midas/ldkp10k", "small")
def order_sections(sample):
  """
  corrects the order in which different sections appear in the document.
  resulting order is: title, abstract, other sections in the body
  """
  
  sections = []
  sec_text = []
  sec_bio_tags = []
  if "title" in sample["sections"]:
    title_idx = sample["sections"].index("title")
    sections.append(sample["sections"].pop(title_idx))
    sec_text.append(sample["sec_text"].pop(title_idx))
    sec_bio_tags.append(sample["sec_bio_tags"].pop(title_idx))
  if "abstract" in sample["sections"]:
    abstract_idx = sample["sections"].index("abstract")
    sections.append(sample["sections"].pop(abstract_idx))
    sec_text.append(sample["sec_text"].pop(abstract_idx))
    sec_bio_tags.append(sample["sec_bio_tags"].pop(abstract_idx))
  sections += sample["sections"]
  sec_text += sample["sec_text"]
  sec_bio_tags += sample["sec_bio_tags"]
  return sections, sec_text, sec_bio_tags
# sample from the train split
print("Sample from train data split")
train_sample = dataset["train"][0]
sections, sec_text, sec_bio_tags = order_sections(train_sample)
print("Fields in the sample: ", [key for key in train_sample.keys()])
print("Section names: ", sections)
print("Tokenized Document: ", sec_text)
print("Document BIO Tags: ", sec_bio_tags)
print("Extractive/present Keyphrases: ", train_sample["extractive_keyphrases"])
print("Abstractive/absent Keyphrases: ", train_sample["abstractive_keyphrases"])
print("\n-----------\n")
# sample from the validation split
print("Sample from validation data split")
validation_sample = dataset["validation"][0]
sections, sec_text, sec_bio_tags = order_sections(validation_sample)
print("Fields in the sample: ", [key for key in validation_sample.keys()])
print("Section names: ", sections)
print("Tokenized Document: ", sec_text)
print("Document BIO Tags: ", sec_bio_tags)
print("Extractive/present Keyphrases: ", validation_sample["extractive_keyphrases"])
print("Abstractive/absent Keyphrases: ", validation_sample["abstractive_keyphrases"])
print("\n-----------\n")
# sample from the test split
print("Sample from test data split")
test_sample = dataset["test"][0]
sections, sec_text, sec_bio_tags = order_sections(test_sample)
print("Fields in the sample: ", [key for key in test_sample.keys()])
print("Section names: ", sections)
print("Tokenized Document: ", sec_text)
print("Document BIO Tags: ", sec_bio_tags)
print("Extractive/present Keyphrases: ", test_sample["extractive_keyphrases"])
print("Abstractive/absent Keyphrases: ", test_sample["abstractive_keyphrases"])
print("\n-----------\n")
Output
Medium Dataset
from datasets import load_dataset
# get medium dataset
dataset = load_dataset("midas/ldkp10k", "medium")
Large Dataset
from datasets import load_dataset
# get large dataset
dataset = load_dataset("midas/ldkp10k", "large")
Citation Information
Please cite the works below if you use this dataset in your work.
@article{mahata2022ldkp,
  title={LDKP: A Dataset for Identifying Keyphrases from Long Scientific Documents},
  author={Mahata, Debanjan and Agarwal, Naveen and Gautam, Dibya and Kumar, Amardeep and Parekh, Swapnil and Singla, Yaman Kumar and Acharya, Anish and Shah, Rajiv Ratn},
  journal={arXiv preprint arXiv:2203.15349},
  year={2022}
}
@article{lo2019s2orc,
  title={S2ORC: The semantic scholar open research corpus},
  author={Lo, Kyle and Wang, Lucy Lu and Neumann, Mark and Kinney, Rodney and Weld, Dan S},
  journal={arXiv preprint arXiv:1911.02782},
  year={2019}
}
@inproceedings{ccano2019keyphrase,
  title={Keyphrase generation: A multi-aspect survey},
  author={{\c{C}}ano, Erion and Bojar, Ond{\v{r}}ej},
  booktitle={2019 25th Conference of Open Innovations Association (FRUCT)},
  pages={85--94},
  year={2019},
  organization={IEEE}
}
@article{meng2017deep,
  title={Deep keyphrase generation},
  author={Meng, Rui and Zhao, Sanqiang and Han, Shuguang and He, Daqing and Brusilovsky, Peter and Chi, Yu},
  journal={arXiv preprint arXiv:1704.06879},
  year={2017}
}
Contributions
Thanks to @debanjanbhucs, @dibyaaaaax, @UmaGunturi and @ad6398 for adding this dataset
- Downloads last month
 - 121